电泳知识方案.docVIP

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  • 2016-11-05 发布于湖北
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电泳是指带电粒子在电场的作用下发生定向迁移(与其本身所带电荷相反的电极移动)的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。 2.生物大分子在电场中移动的速度由什么决定? 答:样品性质方面:粒子大小,形状,带电荷多少,带电性质;电泳条件方面:介质阻力,电场强度,溶液黏度。 3. 粒子的移动速度(泳动速度V)与电场强度(E)、粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子半径(r)及溶液粘度(η)成反比。非球形分子(如线状DNA)在电泳过程中受到更大的阻力,即粒子的泳动速度与粒子形状有关。 迁移率与下列( D )因素无关? A.电荷数量 B.粒子大小 C.溶液黏度 D.电场强度 电泳迁移率(/泳动度/淌度)μ?:带电颗粒在单位电场强度下的移动速度。 ?μ = V/E = Q/6πrη 【影响迁移率的因素: 1. 待分离大分子的性质 :所带的电荷、分子大小和形状,分子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快; 2. 缓冲液pH和离子强度:pH值距pI愈远,Q越大,V越大 ;pH过高或过低?蛋白变性??缓冲液;缓冲液通常要保持一定的离子强度;离子强度过低或过高的不利影响; 3. 电场强度:E高,带电颗粒泳动快。过高,产生焦耳热,样品和Buffer扩散增加,条带增宽;蛋白变性。过低,电泳时间增加,扩散。当需要增大电

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