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Eppendorf plus 移液枪校准方法 1、准备超纯水、万分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十万分之一的天平）、温湿度计、恒温室，还需准备一个小口容器，防止水分挥发。 2、按移液器总量程的100%、50%、10%分别进行第三和第四步。 3、吸头要反复吸取超纯水三次后，吸取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复10次。 4、将测量的数据用iso8655中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取平均值。 5、根据三个测量点的偏差，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。 6、重复3、4步，直至偏差在ISO8655的要求内为止。 ISO 8655-1-2002活塞式容量测量仪器.第1部分:术语、一般要求和用户使用建议 ISO 8655-2-2002 活塞式容量测量仪器.第2部分:活塞式吸量管 ISO 8655-6-2002 活塞式容量测量仪器.第6部分:确定测量误差的重量分析法 三、校准方法及步骤 移液器容量范围 天平可读性 天平的重复性和线性 测量不准确度 1μl~10μl 0.001mg 0.002mg ≤0.002mg 10~100μl 0.01mg 0.02mg ≤0.02mg 100μl 0.1mg 0.2mg ≤0.2mg ? 2、纯水、三蒸水或去离子水，需达到ISO 3696三级水的标准。3、独立工作间，配备防震、防尘、远离热源、无阳光直射的操作台。4、温度计、湿度计。校准操作：为确保校准的准确性，采用三点移液十次，具体步骤如下：1、同温处理，将移液器、吸头、天平、测试用水、操作台等校准用具放置在同一工作间内，至少四小时。2、在正式操作前，先预洗吸头，吸排测试用水5次。3、用最大体积、50%最大体积和最小体积（或10%最大体积），各移液10次，记录每次移液的质量。4、计算每组数据的平均值，代入计算公式，计算出不准确度与不精确度。5、对比可允许的最大误差限度，根据实际需要确定进行调整。附：相关计算公式质量体积转换公式1：V=(w+e)×Z 式中： V=体积（μl）w=质量（mg）e=蒸发损失（mg）Z转换因子以上公式参考ISO 8655标准。蒸发损失对测量小体积液体影响较大，因此应将蒸发损失计算在内。方法：在称过重的容器中注入定量清水，按下秒表观察30秒，读出损失量，然后算出每秒的损失量。（若30s内质量损失3mg，则损失量为3mg÷30s=0.1mg/s）。记录移液时间，将移液时间乘以每秒损失量，算出实际蒸发损失量，代入上述公式计算实际体积。若使用防蒸发装置，通常可以忽略蒸发损失量。不同温度、压力下水的质量和体积不同，具体转换因子Z值请查看附录1。公式2：V20=m×K(t)式中： V20=标准温度20℃下实际体积（μl）m=质量（mg）K(t)值以上公式参考JJG 646-2006移液器检定规程。根据天平测试蒸馏水的质量，以及检测时温度所对应的K(t)值，即可计算出标准温度下蒸馏水的实际体积。具体K(t)值请查看附表2。计算式时，请根据实际需要，选择公式进行计算。不准确度（系统误差）不准确度是指实际移取体积和显示体积的差异。A=- V0 式中： A=不准确度=平均值V0 =标称容量A%=100%×A/V0 不精确度（随机误差）不精确度指每次实际移取体积与实际体积平均值的差异，其变化是不可预计的测量误差的一部分。它可以表示为标准差S或变异系数CV：式中： S =标准偏差=平均值n =测量次数Vi =单次测量数值 CV=100%×S／附表1：转换因子Z(μl/mg)数值表（无菌水） 温度 气压（KPa） 1KPa=10hPa （℃） 80 85 90 95 100 101.3 105 15.00 1.0017 1.0018 1.0019 1.0019 1.0020 1.0020 1.0020 15.50 1.0018 1.0019 1.0019 1.0020 1.0020 1.0020 1.0021 16.00 1.0019 1.0020 1.0020 1.0021 1.0021 1.0021 1.0022 16.50 1.0020 1.0020 1.0021 1.0021 1.0022 1.0022 1.0022 17.00 1.0021 1.0021 1.0022 1.0022 1.0023 1.0023 1.0023 17.50 1.0022 1.0022 1.0023 1.0023 1.0024 1.0024 1.0024 18.00 1.0022 1.0023 1.0023 1.002