- 1、本文档共9页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
专题1 ? 基因工程
基因工程的概念:
基因工程是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞,并使重组基因在受体细胞中表达,产生人类需要的基因产物的技术,又称为DNA重组技术。
概念分析:
①基因工程技术的原理:基因重组
②目的:创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
③操作水平:DNA分子(基因)水平
(一)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)
(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:
①相同点:都缝合磷酸二酯键。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体
(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体: 噬菌体的衍生物、动植物病毒。
在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
(二)基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的获取
1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。
2.原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
3.PCR技术扩增目的基因
(1)原理:DNA双链复制 实质:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
(2)过程:第一步:(变性)加热至90~95℃DNA解链;第二步:(复性)冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:(延伸)加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
第二步:基因表达载体的构建
1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
2.组成:复制原点+启动子+目的基因+终止子+标记基因
(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。
(2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段 ,位于基因的尾端。
(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素抗性基因。
第三步:将目的基因导入受体细胞
1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2.常用的转化方法:
导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵(或卵细胞)。
导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较
少 ,最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ,其转化方法是:先用 Ca2+ 处理细胞,使其成为感受态细胞 ,再将重组表达载体DNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程离体的植物器官、组织或细胞 ―→ 愈伤组织 ―→―→ 试管苗 ―→ 植物体细胞贴壁
核移植
胚胎移植
(4)体细胞核移植技术的应用:
①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育; ②保护濒危物种,增大存活数量;
③生产珍贵的医用蛋白; ④作为异种移植的供体; ⑤用于组织器官的移植等。
(5)体细胞核移植技术存在的问题:
克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。
3.动物细胞融合
(1)动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。
(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。
(3)动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和
您可能关注的文档
- 黑龙江省大庆市2015届高三第二次教学质量检测(二模)理科综合试题().doc
- 黑龙江省大庆市2015届高三第二次教学质量检测(二模)数学(理)试题().doc
- 黑龙江省大庆市2015届高三第二次教学质量检测(二模)数学(文)试题().doc
- 黑龙江省大庆市2015届高三第二次教学质量检测(二模)文科综合试题().doc
- 黑龙江省大庆市2015届高三第二次教学质量检测(二模)英语试题().doc
- 黑龙江省大庆市2015届高三第二次教学质量检测(二模)语文试题().doc
- 黑龙江省哈尔滨市第六中学2015届高三下学期第一次模拟考试俄语试题 缺答案.doc
- 黑龙江省哈尔滨市第六中学2015届高三下学期第一次模拟考试英语试题 答案不全.doc
- 黑龙江省哈尔滨市第六中学2015届高三下学期第一次模拟考试语文试题 答案不全.doc
- 黑龙江省双鸭山一中2015届高三上学期期末考试 生物 含答案.doc
最近下载
- 浙江金兰教育合作组织2023_2024学年高一下学期语文期中考试试卷(含答案).docx VIP
- 2023年中外历史纲要上第16课两次鸦片战争 教学课件.pptx
- 《泡沫塑料制造工艺》课件.ppt
- Unit+6+Survival+Understanding+ideas+课件【知识精讲】高二英语外研版(2019)选择性必修第二册.pptx
- 静脉治疗护理技术操作标准(2023版)解读PPT课件.pptx VIP
- Unit4Theseareflowers(课件)湘少版英语四年级上册.pptx
- 2024年无锡职业技术学院单招数学考试试题及答案解析.docx
- 普通高中体育与健康课程标准(2017年版2020年修订).pdf
- 欧洲证q券和市场管理局(ESMA)区块链报告(英文).pdf
- 屠宰厂有机猪屠宰作业规程汇编.docx
文档评论(0)