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(5)蛋白质工程是先设计蛋白质的结构与功能,再反推其基因结构,然后从基因的水平进行改造,从而对蛋白质进行改造或制造出自然界没有的蛋白质,两者都是从分子水平进行操作,但基因工程只能合成天然存在的蛋白质。 答案 (1)蛋白质工程 基因工程 胚胎移植技术(任写两种) (2)推测应有的氨基酸序列 基因表达载体 (3)DNA(核酸)分子杂交 促性腺激素 (4)改造后的基因能够遗传(且改造基因易于操作) (5)B 专题二十五 基因工程(含转基因生物的安全性 与生物武器) 基因工程的工具及操作程序 1.基因工程的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(分子手术刀) ①来源:主要从 生物中分离纯化。 ②作用:识别双链DNA分子的某种 ,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 原核 特定核苷酸序列 磷酸二酯键 (2)DNA连接酶 黏性末端 平末端 常用类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 功能 连接黏性末端 连接 结果 都缝合 ,如图 大肠杆菌 T4噬菌体 黏性末端和平末端 磷酸二酯键 (3)载体 复制 限制酶切割位点 标记 质粒 λ噬菌体 携带外源DNA片段进入受体细胞 2.基因工程的操作程序 基因文库 PCR DNA合成仪 启动子 标记基因 农杆菌转化法 花粉管通道法 显微注射 DNA分子杂交 分子杂交 抗原—抗体杂交 个体生物学水平 1.基因工程的应用 基因工程的应用、蛋白质工程 及基因,工程的安全性 技术 名称 应用 植物基 因工程 培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和 转基因植物,利用转基因改良植物的品质 动物基因工程 提高动物 ,改善畜产品的品质,用转基因动物生产药物,用转基因动物作 的供体 基因 治疗 把 导入病人体内,使其表达产物发挥作用,从而治疗疾病,分为 和体外基因治疗 抗逆 生长速度 器官移植 正常基因 体内基因治疗 2.蛋白质工程 (1)概念理解 ①基础:蛋白质分子的 及其与生物功能的关系。 ②操作: 或基因合成。 ③结果:改造了现有蛋白质或制造出 。 (2)操作过程:从预期的 出发→设计预期的 →推测应有的 →找到相对应的 (基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。 结构规律 基因修饰 新的蛋白质 蛋白质功能 蛋白 质结构 氨基酸序列 脱氧核苷 酸序列 3.转基因生物的安全性与生物武器 (1)转基因生物的安全性 基因结构 异种生物 随机的 (2)生物武器 ①种类:致病菌、 、生化毒剂 ,以及经过 的致病菌。 ②中国政府的态度:在任何情况下 生物武器,并反对 的扩散。 食物 生物 环境 趋利避害 因噎废食 病毒 基因重组 不发展、不生产、不储存 生物武器及其技术和设备 1.基因工程的基本原理和理论基础概括(如下图) 基因工程的工具及操作程序 2.基因表达载体的组成和构建 (1)组成 注:除抗生素抗性基因外,绿色荧光蛋白基因,产物具有颜色反应的基因也常被用作载体的标记基因。 (2)构建过程 3.将目的基因导入受体细胞 受体细 胞种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 (大肠杆菌) 常用 方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 Ca2+处理法 受体 细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 转化 过程 将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→导入农杆菌→侵染植物细胞→目的基因整合到受体细胞的DNA上,稳定维持和表达 将含有目的基因的基因表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵移植→获得具有新性状的动物 Ca2+处理大肠杆菌细胞→感受态细胞→将重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 4.目的基因的检测表达 【典例1】 (2014·山东潍坊二模)下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程,请据图回答下列问题: (1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,那么在①过程中, 应用限制酶________切割质粒,用限制酶__________切割抗虫基因。①过程在________(体内/体外)进行。 (2)通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有____________的培养基上,若大肠杆菌能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入,该培养基从功能方面属于________培养基。 (3)重组质粒导人大肠杆菌的目的是_____________________
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