沙棘果粉体外抗氧化研究.doc

沙棘果粉体外抗氧化活性的研究 （青海圣烽生物技术开发有限公司，青海 西宁 810016） 摘要：采用不同方法测定沙棘果粉的抗氧化能力活性。实验条件下，沙棘果粉对DPPH自由基、超氧阴离子O2-、羟基自由基（·OH）、过氧化氢H2O2有较强的清除或抑制作用，且显示较好的量效关系。所以沙棘果粉有效成分具有较好的抗氧化作用。 关键词：沙棘果粉；抗氧化；FRAP还原力；DPPH自由基；超氧阴离子；羟基自由基Study of antioxidant activity in sea-buckthorn powder （Qinghai Shengfeng biotechnology development co., LTD， Xining，810016） Adopting different determination methods, the activity of antioxidant capacity of sea buckthorn fruit powder was studied. Under experimental conditions, sea-buckthorn fruit powder has antioxidant capacity to DPPH, superoxide anion free radical O2 -, hydroxyl radicals (? OH), hydrogen peroxide H2O2, and shows good concentration relationship with activity of antioxidant capacity. Results show that sea-buckthorn fruit powder has good anti-oxidation active. 氧在生物体内通过单电子还原产生化学性质活泼的物质称为活性氧，包括超氧阴离子自由基、过氧化氢、羟基自由基等，它们可以与多元不饱和脂肪酸作用，造成脂质过氧化，从而诱发多种慢性疾病。抗氧化剂能有效清除自由基，延缓衰老和预防疾病。目前人们把抗氧化研究重点转向了天然、高效的天然植物提取物上，因此抗氧化活性评价方法对天然抗氧化剂的研究开发至关重要。 沙棘，是胡颓子科植物沙棘(Hippophae rhamnoides L.)的成熟果实，又名沙枣、醋柳、黑刺。沙棘果中富含丰富的维生素、黄酮、酸酚、超氧化物歧化酶及ω-6多不饱和脂肪酸等营养成分和活性物质。现代医学研究证实，沙棘果具有抗衰老、清除自由基、抗辐射、提高免疫力、抗肿瘤等作用。通过喷雾干燥技术加工的沙棘果粉中含有维生素、黄酮、多糖、儿茶素等大量天然抗氧化活性成分，这些活性物质能与铅发生络合作用形成低毒或无毒络合物排出体外，对骨和肝组织有明显促排铅作用，能抗氧化和消除细胞膜上自由基，可以减少机体的氧化损伤，是天然的抗氧化剂。 本试验以沙棘果粉为原料，测定其主要功效成分的含量并以化学测定方法评价沙棘果粉抗氧化活性评价体系，从FRAP（Ferric reducing antioxidant potential Assay）总的抗氧化能力、清除DPPH自由基、清除O2-、抑制·OH等研究沙棘果粉的抗氧化效果，为沙棘果粉活性成分的综合利用提供依据。 １材料与方法 1.1试验材料 1.1.1试验原料 沙棘粉 1.1.2试验试剂 DPPH（1，1－二苯基－２－三硝基苯肼）、没食子酸丙酯（PG）、硫酸亚铁、30%过氧化氢、三羟甲基氨基甲烷（Tris）、三氯乙酸、三氯化铁、铁氰化钾、盐酸、邻苯三酚、水杨酸、无水乙醇等 11.3试验仪器 分光光度计，PHS-25数显pH计，TDD5M型低速离心机。 1.2试验方法 1.2.1活性成分提取 称取2.00ｇ沙棘果粉→蒸馏水浸泡30min（料液比1:16（m/v））→超声提取30min，室温提取2次→4000r/min离心5min→合并上清液→蒸馏水补重→低温避光，待用。 1.2.2总抗氧化活性的测定—磷钼络合物法 配制浓度分别为 1、2、3、4、5mg/mL 的样品溶液、PG 溶液。在 10mL 比色管中，分别加入 4.0mL 磷钼试剂液、0.4mL 样品液，95℃水浴中恒温 90min，用紫外可见分光光度计在 695nm 波长下测吸光度 A。所有测定平行进行 3 次，取平均值。 1.2.3沙棘粉乙醇提取物还原力测定 取不同浓度乙醇提取液2.5ｍＬ，其中加入pH为6.6、浓度为0.2mol/L的磷酸缓冲液2.5mL、１％的铁氰化钾溶液2.5 mL，混匀后在50℃水浴加热20min，取出迅速冷却至室温后添加10％三氯乙酸2.5 mL，以4000ｒ/min离心5min，吸取上清液5.0ｍＬ滴加1.0 mL