临床病原体检测2课件.pptVIP

临床病原体检查的基本程序 医生、护士、病人：正确采集、运送标本 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验－－报告结果 医生：明确诊断、合理用药 第一节　 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法 标本采集－－呼吸道分泌物 标本采集：经鼻、咽拭子以及气管 病原体培养： 病毒：鼻病毒、呼吸道合胞病毒 衣原体：肺炎衣原体 链球菌：溶血链球菌 标本采集－－呼吸道分泌物 留取标本方法 ----自然咳痰法：晨痰，且在取痰前反复漱口 ----气管镜下采集法 ----气管穿刺法 ----气管插管采集 符合要求的痰标本－低倍镜下 ---- ≤10鳞状上皮细胞/LP ---- ≥25 个白细胞/LP 标本采集－－脑脊液及其它无菌体液 脑脊液：腰椎穿刺，抽取2-3ml，置于无菌容器中 可致脑膜炎的病原体包括：脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等 其抵抗力弱、不耐冷、易死亡，需立即保温送检或床旁接种 标本采集－－脑脊液及其它无菌体液 浆膜腔积液及腹膜透析液 胸水、腹水、心包积液含菌量少，需较大量标本 标本接种于血培养瓶中 感染病人腹膜透析液培养者采集标本量大，需50ml以上 标本采集－－泌尿生殖道分泌物 男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液 女性：用无菌棉签采集病灶、阴道或宫颈分泌物 怀疑盆腔厌氧菌感染－阴道后穹隆穿刺法，并立即接种于厌氧平板 疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立即送检 淋病奈瑟菌保温送检，其余标本收集后4℃保存，如超过24h需-70 ℃保存 标本采集－－脓液及创伤感染 分泌物 大面积创面分泌物：用无菌棉签多点采取脓液或分泌物－－肉芽表层 采集前清除污物，严格消毒，避免表面细菌混入标本影响培养结果 开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉签采取脓液或病灶深部分泌物 封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取－－怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集 标本采集－－眼、耳部标本 眼部标本采集： 拭子 麻醉后角膜刮屑 标本采集－－眼、耳部标本 耳部标本采集： 外外耳道疖肿和中耳道炎者拭子采样 新生儿、老年人可鼓膜穿刺 标本采集－－血清 特异性抗体效价---辅助诊断感染性疾病 采集血液---无菌试管，自然凝固后取血清，56℃加热30min灭活补体 灭活血清保存于-20℃ 直接镜检常具有更高临床诊断价值---因抗生素的应用可致培养阴性 荧光显微镜检查---结核分枝杆菌、麻风分支杆菌、白喉棒状杆菌 结合免疫标记技术检查相应抗原 电镜---轮状病毒 血清学实验 检测特异性病原体抗体 IgM可早期诊断，见于原发性感染 IgG见于复发性感染 一般不适用于早期诊断 感染后4-5天后可检出抗体，2周后效价逐渐提高 疾病追溯性调查 疾病早期以及晚期分别采血2-3次 凝集试验、ELISA、沉淀试验、补体结合试验、放免试验等 第二节 病原体耐药性检查 据广州日报4月8日报道，世界卫生组织将「控制抗菌素耐药性」作为2011年世界卫生日的主题。抗菌素耐药性这个影响人类健康的问题由来已久，近年来在多个国家发现的「超级细菌」更说明这一问题已日趋严重。英国研究人员指出，这敲响了全球公共卫生体系的警钟。据介绍，这类「超级细菌」仍在进一步蔓延。??? 耐药性或致「无药可治」??? 统计显示，在印度和巴基斯坦确认感染这类「超级细菌」的病例已达150例，英国也有70例，此外欧洲的奥地利、比利时、德国、荷兰、挪威、瑞典、法国，北美的加拿大和美国，非洲的肯尼亚，亚洲的日本、新加坡等国都有数量不等的确认病例。??? 这些细菌具有很强的耐药性，它们能抵御大多数抗菌素的药效，而其中一些细菌甚至对现在所有抗菌素都有耐药性，简单地说就是「无药可治」。 一、耐药性以及产生机制 耐药性 耐药病原体的产生 耐药机制 细菌耐药性 耐药性变异：对某种药物敏感的细菌变为对其耐受的变异 耐药性的获得：细菌染色体耐药基因突变、耐药质粒的转移和转座子的插入产生特殊的多肽、酶类物质导致耐药 耐药机制 细菌水平和垂直传播耐药基因的整合子系统 耐药基因盒编码相应的耐药 产生灭活抗生素的水解酶、钝化酶：碳青霉稀酶、ESBLs 细菌抗生素作用靶位的改变 细胞膜外排泵出系统 细菌生物膜的形成 细菌生物膜：附着于有生命、无生命物体表面被细菌胞外大分子包裹的有组织的细胞群体 多细胞结构：屏障作用、微环境变化、诱导特异表型、多菌种协同作用 第三节 临床感染常见病原体检测 感染性疾病 感染性疾病－－各种生物性病原体在人体寄生而引起 传染性感染性疾病 非传染性感染疾病 临床常见病原体为：细菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、立克次体 以及真菌、寄生虫等 第四节 病毒性肝炎检测 两对半: HBs