HPLC常见问题技术总结.ppt

HPLC常见的机型 1100/1200/1200SL 系列 1260 系列 1120/1220系列 1290 流动相系统的问题 溶剂过滤头 （脏，长菌—堵塞） 处理步骤： 水冲洗残留的溶剂 浓硝酸（35％）的烧杯里浸泡2小时 二次蒸馏水彻底冲洗过滤器 不能使用超声波清洗，金属滤头可以超声 脱气机常见问题 1. 脱气效果降低 ，通道管线内壁出现气泡，有堵塞 处理方法： 简单处理 ：60℃热水冲洗1h，再用纯甲醇或异丙醇冲洗1h（建议至少1个月做一次） 深度处理：10%双氧水加1%冰醋酸冲洗 特殊处理 ：正相系统，可以考虑使用二氯甲烷，丙酮，正己烷等溶剂冲洗 2. 漏液：一般都是脱气机的腔体坏了，需要上门维修 泵常见的问题 压力高： 流路分段拆开排查 使用水，无毒，经济 首先考虑过滤白头 所有堵的处理方法都是一样：合适的溶剂合适的位置反冲 泵常见的问题 2. 压力不稳或不能泵出液体 原因： a. 气泡 b. 比例阀 c. 单向阀 d. 泵头密封圈磨损 处理思路： 气泡引起的：100%纯甲醇冲洗系统（不建议异丙醇，粘度过大，后续工作繁琐 ） 比例阀内漏或堵塞引起的：可以先使用溶剂冲洗方法，（50℃度热水，纯甲醇，或10%双氧水）。如果不行则建议工程师上门更换维修了。 泵常见的问题 单向阀的问题 主动阀： 阀芯可以使热水，甲醇，异丙醇超声或更换 被动阀 ：不建议超声 出口阀 ：冲洗或更换 如果不泵液体，不管是AIV还是PIV，拆下来，使用洗耳球吹一下，再装上去，使用纯甲醇冲洗，一般10min就好 泵常见的问题 3. 泵漏液： 处理 ： 泵的密封圈漏液更换 （建议一年换一次） Seal wash的二级密封圈漏液，更换 4. Seal wash 蠕动泵漏液或不能泵液 原因 ：白色蠕动泵管线老化粘连 进样器系统/手动进样G1328A/B/C 手动进样G1328A/B/C 常见的故障：“堵”、 “漏 ” 1. 堵：按照流路分段排查—loop、转子超声 2. 漏：针导入流路和转子是否磨损（状况：压力不稳，进完样有液体从进样口流出，重现性差，残留严重） 3. 阀的清洗 a. 将进样器转至Inject位置，利用泵冲洗(冲洗样品环及沟槽） b. 用阀清洗接头和注射器冲洗 手动进样的重现性差问题 防止虹吸，第五、六号放空管的出口与进样口保持在同一平面 由于毛细管效应进样的体 积至少是定量环体积的3倍 3. 使用合规格的进样器，推荐 平头针，不能使用尖头针 4. 进样方法： load位置注入样品，迅速转到inject位置，稍等2S，拔针 ALS的进样程序和系统 Metering device 6-port valve Sampling unit From pump To column To waste 准备位置 调用样品瓶吸样品 进样和运行位置 ALS常见故障和解决方案 自检不通过 ：传动单元是否有异常、绿色指帽是否脱落、门没关、8位开关除尘，无水酒精擦拭传动杆 2. 漏液：检查loop和针的接头处、针和针座连接处、六通阀 抓手位置偏移 ：工程师上门维修 4. 堵：压力高或进样前后压力差超过10bar 按照流路分段排查，反冲 大部分堵的地方都在针、针座、六通阀等部分 （针、针座可以反冲或拆下来超声；六通阀可以考虑“对特定的点”反接冲洗，但最彻底的办法是拆开超声清洗转子、定子、阀头） ALS常见故障和解决方案 5. 峰面积重现性不好 解决思路 ： 样品粘稠，抽吸速度不合适 计量泵密封圈磨损 转子密封圈磨损 进样系统堵塞：针、针座、4号排空管路 ALS常见故障和解决方案 6. 进样残留大 洗针瓶的瓶盖 进样针外壁和针座接触处 六通阀管线接头处存在死体积 转子面 柱温箱注意事项 左右加热快体积不一样，左边3ul，右边 6ul。一般首选左侧加热块以减小延迟体积和死体积 当使用温度比室温低，或者夏天的时候，仪器报警，泄露，考虑关闭冷凝水功能，或者直接关闭泄露传感器 TCC堵了，反冲 RID分析乳糖(药典方法)如果有噪音大的问题，需要对TCC就行改造。 检测器VWD光路 检测器DAD光路 常见的问题和解决思路 灯不能点亮： 灯的使用时间 连接是否良好 考虑硬件故障 2. 能量测试不过： 灯打开预热时间足够，系统使用水冲洗干净 灯使用寿命 流通池、光学单元污染 常见的问题和解决思路 3. 波长丢失，校正失败 何时需要校正 ：换灯，换流通池 ，更换主板 如何校正：开灯10min以上，纯水冲洗系统 为何失败 ：