集成化蛋白质组定量分析系统（2012cb910604）-生物分子高效分离.docVIP

国家重点基础研究发展计划（重大科学研究计划）课题年度报告 项目编号：2012CB910600 项目名称：蛋白质定量新方法及相关技术研究集成化蛋白质组定量分析系统按照项目任务书要求本课题在20年度主要针对集成化蛋白质组定量分析系统，侧重开展了研究工作超高灵敏度蛋白质定量分析系统。按项目任务书的规定，完成了研究内容和预期目标。鉴定到271个蛋白，鉴定到个蛋白group聚丙烯酰胺整体/低转移细胞株蛋白提取物分析，发现了24种蛋白质发生了明显变化； 在集成化蛋白质分析平台方面：1）构建了集成化蛋白质定量分析系统，实现了蛋白质酶解、在线标记、肽段分离以及质谱检测的集成化，可从10万个细胞中定量到约1700个蛋白质；2）构建了基于反相色谱-溶剂置换接口-固定化酶反应器-反相色谱-质谱的集成化蛋白质组分析平台RSD值为19.63%，用于小鼠腹水型肝癌淋巴道高/低转移细胞系蛋白质提取物分析，发现7种蛋白质在低转移细胞中高表达， 9种蛋白质在高转移细胞中高表达； 在超高灵敏度蛋白质定量分析系统0.34 amol，相对偏差RSD1.58%，动态范围1-105；2）构建了二维阵列液相色谱系统提高了自动化程度和m）垂直固定在一铁夹中。用注射器吸取一定量的聚砜浆料注满枪头。取一段毛细管垂直正中插入枪头的浆料内并穿过枪头的出口端，再将毛细管上端垂直固定在一环内，并在毛细管的下端悬挂一重物。在枪头的正