T-SPOT与预防性抗结核治疗技术总结.ppt

Dear Mr. Chairman, Ladies and gentlemen. Good afternoon. I am Lanjuan Li, from Zhejiang University in China. I am pleased and honored to be here and to have the opportunity to introduce the progress of gut microbiota in liver disease. 尊敬的大会主席，女士们、先生们，大家下午好，我叫李兰娟，我来自中国浙江大学。我很荣幸能有机会向大家感染微生态的最新研究进展。 * * * * * * * Dear Mr. Chairman, Ladies and gentlemen. Good afternoon. I am Lanjuan Li, from Zhejiang University in China. I am pleased and honored to be here and to have the opportunity to introduce the progress of gut microbiota in liver disease. 尊敬的大会主席，女士们、先生们，大家下午好，我叫李兰娟，我来自中国浙江大学。我很荣幸能有机会向大家感染微生态的最新研究进展。 * T-SPOT TB与预防性抗结核治疗 硕士研究生：李思颖 导 师：杨益大教授 2015.11.6 传染病诊治国家重点实验室 感染性疾病诊治协同创新中心 浙江大学医学院附属第一医院 主要内容 T_SPOT_TB的原理 01 预防性抗结核治疗对象及方案 04 T_SPOT_TB结果判读 03 T_SPOT_TB检测方法 02 T_SPOT.TB的原理 外周血T-SPOT即利用酶联免疫斑点技术（ELISPOT）通过检测结核分枝杆菌特异性抗原刺激后外周血单个核细胞释放的γ-干扰素来检测抗原特异性 Ｔ淋巴细胞的应答反应，从而判断结核感染状态。 每一个斑点代表一个分泌细胞因子的T细胞，记数斑点数量可以获得外周血中结核致敏的T细胞数量。 T_SPOT.TB的原理 结核特异性抗原 早期分泌靶向抗原(ESAT-6) 01 培养滤过蛋白(CFP-10) 02 由结核杆菌基因组RD1区相同的操纵子编码的蛋白，只存在于结核分枝杆菌群(包括人型、牛型和非洲型分枝杆菌)及其它几种致病性分枝杆菌(如堪萨斯分枝杆菌，Szulgai 分枝杆菌，海分枝杆菌)中，是T 细胞的靶抗原，能诱导皮肤迟发型超敏反应并刺激外周血单核细胞产生γ-干扰素。 T_SPOT.TB检测方法 T-SPOT检测过程：收集1*10^6外周血单个核细胞，平均分为4份，每份细胞数为2.5*10^5，分别加入空白对照、抗原A（ESAT-6）、抗原B（CFP-10）、阳性对照孔中。然后使用ELISPOT 法，并分别记录每个孔中斑点形成细胞数目（SFCs）。 T_SPOT.TB检测方法 当空白对照≤5 SFCs时，只要（A-空白）或者（B-空白）≥6 SFCs考虑为阳性，存在结核感染。 当空白对照≥6 SFCs时，要求A或B孔细胞数大于空白两倍才考虑阳性。 T_SPOT.TB结果判读 注：部分化验单回报结果为A、B实验孔出现斑点形成细胞数目（SFCs）减去空白对照后乘以4，因此化验单上界值为6 SFCs*4=24。 只要A或者B值≥24则考虑存在结核感染，AB值之和大于500-600考虑活动性结核可能。 T_SPOT.TB结果的判读 01 02 无反应性：表明样本中可能不存在针对结 核杆菌特异的效应T细胞 有反应性：表明样本中存在针对结核杆菌 特异的效应T细胞 T_SPOT.TB 阳性 活动性结核病：结核中毒症状，影像学检查支持结核病诊断，临床排除其他疾病 结核感染状态：结核中毒症状，无影像学等临床检查证据，临床排除其他疾病，试验性抗结核治疗有效 既往结核感染：无结核中毒症状，影像学显示病灶存在（钙化或陈旧性病灶），存在结核病史