11致病性大肠埃希菌血清学检测标准操作规程.docVIP

文件名 临床微生物SOP-致病性大肠埃希菌血清学检测标准操作规程 编制人 审核人 批准人 批准日期 修改日期 签 字 修改日期 签 字 复审日期 签 字 复审日期 签 字 1.目的 规范致病性大肠埃希菌血清学检验标准操作规程。 2.原理 在确定大肠杆菌后，用已知的致病性大肠埃希菌诊断血清在载玻片上直接与细菌培养物或菌悬液混合，若出现肉眼可见的特异性凝集块，表示该菌即为致病性大肠埃希菌。 3.试剂 致病性大肠埃希菌诊断血清，生理盐水。 4.质控 致病性大肠埃希菌阳性；大肠埃希菌ATCC 25922 阴性。 5.操作步骤 5.1 先以生化反应确定为大肠埃希菌，再以抗原分析定型。 5.2 用接种环挑取大肠埃希菌依次于数组多价OK抗血请作玻片凝集试验（其分组血清型见试验盒说明书），若与某一单价血清呈现凝集反应，可初步确定为相应血清型，再用菌液与OK抗血清确定亚型。 5.3 如不凝集或凝集微弱，可视为阴性。再挑取另一个菌落，如上法试验，如此检查5～10个菌落，若均不凝集，可最终判定为阴性。 6.结果判断 阴性：试验一侧及对照一侧均匀浑浊。阳性：对照一侧均匀浑浊，试验一侧明显凝集。自凝：试验一侧及对照一侧凝集。 7.注意事项 大肠埃希菌各血清型间的抗原关系十分密切，特别是O抗原。玻片凝集反应仅作为阴性标本筛选，确定试验须定量凝集试验。 8.临床意义 主要用于致病性大肠埃希菌的血