山葡萄论文：山葡两个ICE1同源基因的克隆与表达特性研究.docVIP

山葡萄论文：山葡萄两个ICE1同源基因的克隆与表达特性研究 【中文摘要】低温是限制植物分布与生长的重要环境因素,而且低温冻害是全球农林业普遍存在的自然灾害,给全世界农林业造成了巨大的损失。随着分子生物学技术的发展,寒害研究已经深入到分子水平,从而促进植物抗寒基因工程的发展。本试验以山葡萄为材料,采用电子克隆技术从山葡萄EST数据库中拼接到两个ICEl基因,应用户RT-PCR扩增得到两个基因编码区全长序列,分别命名为VaICEla和VaICE1b。结果如下：VaICE1a基因的cDNA全长为1617bp,根据核苷酸推导出的氨基酸序列分析表明它由538个氨基酸组成,命名为VaICE1a。cDNA序列和编码的蛋白序列结果显示其含有一个富s区、核定位信号区(NLS)、转膜区。山葡萄VaICEla基因与欧洲葡萄(XP-002275711)、苹果、毛果杨、欧洲葡萄(XP-002284528)、拟南芥、小麦的同源性分别为99%、61%、62%、64%、60%、76%。该序列在C端高度保守,具有ICE基因典型的BHLH结构域。系统发育分析将VaICE1a基因归入ICEl进化系。三级结构分析表明ValCEla为混合型蛋白。上述结果表明VaICE1a可能为ICEl基因家族的一个新成员。半定量PCR结果表明VaICE1a在山葡萄的不同组织部位均不同程度的表达,在四种非生物逆境胁迫下VaICE1a基因