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第三节 动物细胞工程 【学习目标】 1、简述动物细胞培养的过程、条件及其应用 2、简述克隆动物的概念含义和基本原理 3、简述体细胞核移植技术和动物克隆技术，以及应用前景 4、简述动物细胞融合的方法和过程 5、简述单克隆抗体的制备过程及其应用 【课前预习】 一、动物细胞与组织培养 1、概念：是指在体外模拟动物体内环境，将动物的 在 的条件下培养，使其继续生长、增殖并维持原有结构和功能的技术。 2、条件：动物细胞培养的环境条件，包括 ； 动物细胞与组织培养的培养基，可分为 和 。 动物细胞与组织培养的细胞，一般为 、 或 。 二、细胞核移植与动物体细胞克隆 动物体细胞克隆：是将供体体细胞的 与受体 进行人工组合，借助于 的发育能力，经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。 细胞核移植技术：是一种利用显微操作技术将某种动物细胞的 移入 或 动物的 内的技术。 三、细胞融合和单克隆抗体 1、细胞融合概念：是指在一定的条件下将 细胞融合为 的过程。 2、诱导细胞融合的方法有： 法（如 ）、 法（如 ）；和 法（如 ）。 3、单克隆抗体制备：给小鼠注射特定的 ，从 中分离B淋巴细胞（即浆细胞）与 细胞融合，经培养，筛选出 细胞，使其在 或 培养，迅速增殖，分泌出 ，即为单克隆抗体。 【共同探究】 一、动物细胞与组织培养 1、概念： 2、动物细胞培养的过程： 【思考题1】为什么动物细胞要分散成单个细胞培养？用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？思考一下，这是什么道理？ ，所以更容易培养。 动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？植物的任何一部分，甚至单个细胞都具有长成完整植株的能力。但要发育成完整植株，必须先脱分化，脱分化的细胞具有发育成任何组织的能力，然后进行再分化，形成完整植株。①对培养液和所有培养用具进行无菌处理。（为什么？） ②营养（培养基）。根据营养物质的来源，一般将培养基分为 天然培养基 和 合成培养基 ；天然培养基主要取自 、 和 等；合成培养基是人工配制的，包括多种营养物质如 等，合成培养基中仍需加入动物血清，为什么？ 。细胞外培养所需营养与体内基本 （相同、不同）。 定期更换培养液，以便 。 ③环境条件：温度。一般与动物的 ，如哺乳动物多为 ℃。 pH。多数细胞生存的适宜pH为 。 气体环境。O2是 所必需的；CO2的主要作用是 。O2和CO2的含量不仅影响环境的 ，还直接影响 。 【思考题5】为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 【思考题10】用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞是 为了保证 。 用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 3、意义： 克服动物种间杂交障碍、创造新物种；大量复制实验动物；利用异种动物借腹妊娠挽救珍稀动物；利用患者自身的细胞培育新的组织或器官用于组织器官的移植。