实验二叶绿素的提取与分离精讲.doc

实验二 叶绿素的提取和分离 实验目的 从富含叶绿素的菠菜叶片中提取叶绿素，并在薄层层析板上点样使叶绿素显示不同颜色。 实验原理 要求同学们先查询资料，了解叶绿素相关知识，实验课上老师讲解。 实验材料、器具 研钵分液漏斗饱和NaCl溶液无水Na2SO4叶绿素的提取 在中放入几片(约5g)菠菜叶(新鲜的或冷冻的都可以．如果是冷冻的解冻后包在纸中轻压吸左水分)。加10mL2:1石油醚和混合液，适当研磨。将提取液用滴管转移至分液漏斗中，10mL饱和NaCl溶液(防止生成乳浊液)除去水溶性物质，分去H2O层，再用蒸馏水洗涤两次。将有机层转入干燥的小锥形瓶中，加2g无水Na2SO4。后的液体倾至另锥形瓶中(如溶液颜色太浅，可在通风柜中适当蒸发浓缩)。点样 用一根内径 1mm的毛细管，吸取适量提取液，轻轻地点在距薄板一端1cm处，平行点两点，两点相距1cm左右。若一次点样不够，可待样品溶剂挥发后．再在原处点第二次，但点样斑点直径不得越过2mm。 展开 先在中放入展开剂[再将薄层板斜靠于层析缸内壁。点样端接触展开剂但样点不能浸没于展开剂中，密闭缸。待展开剂上升到距薄层板另一端约1cm时，取出平放，用铅笔或小针划前沿线位置，晾干或用电吹风吹干薄层。 薄层层析时Rf值表示的是原点到层析斑点中心的距离与原点的到展层溶剂的前沿距离 包括扩散最快的是什么，扩散最慢的是什么 最宽的色素带是什么，最窄的