实验2底物浓度对酶活力的影响(碱性磷酸酶米氏常数的测定)-lv-中医案例.pptVIP

Unico UV-2000分光光度计的使用 仪器操作键介绍 “方式设定”键（MODE）：用于设置测试方式—— 透射比（T）、吸光度（A）、已知样品浓度值（C）、已知标准样品斜率（F） “100%”键：用于自动调整100.0%T(100.0透射比)或0ABS(零吸光度) “0%”键：用于自动调整零透射比 “波长设置”旋钮：用于设置分析波长 3.样品测试操作 ① 打开电源开关，使仪器预热20分钟 ② 用“波长设置”按钮将波长设置在您将要使用的分析波长位置上 ③按“方式键”（MODE）将测试方式设置为透射比（T） ④将参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中 ⑤打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿和黑体分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖 ⑥盖好样品室盖，将黑体推或拉入光路，按“0%”键调透射比零 ⑦将参比溶液推入或拉入光路中，按“100%”调100.0 ⑧按“方式键”（MODE）将测试方式设置为吸光度（A） ⑨将被测溶液拉入光路中，此时，显示器上所显示是被测样品的吸光度参数 实验完成后，关闭电源，洗净比色皿，并盖好盖布。 THANK YOU 米氏常数 它的数值等于酶促反应达到其最大速度Vm一半时的底物浓度〔S〕 1.Km物理含义 Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，即当V=Vm/2时，【S】=Km,单位为mol/l。Km是酶极为重要的动力学参数，其物理含义是指ES复合物