实验八-蛋白质的性质实验案例.ppt

实验八 蛋白质的性质实验 蛋白质及氨基酸的呈色反应  1.加深理解所学有关的蛋白质性质的理论知识 2.掌握氨基酸和蛋白质常用的定性、定量分析的方法及原理 一、蛋白质呈色反应 蛋白质的呈色反应是指蛋白质所含的某些氨基酸及其特殊结构，在一定条件下可与某些试剂发生了生成有色物质的反应。 不同蛋白质分子所含的氨基酸残基不完全相同，因此所发生的成色反应也不完全一样。 呈色反应并不是蛋白质的专一反应。因此，不能仅仅根据呈色反应的结果为阳性就来判断被测物质一定是蛋白质，至少要用2种以上的方法来鉴别。 （一）双缩脲反应 【实验原理】 当尿素经加热至180℃左右时，两分子尿素脱去一分子氨，进而缩合成一分子双缩脲。其在碱性条件下双缩脲与铜离子结合成红紫色络合物，此反应称为双缩脲反应。其反应过程如下： 多肽及蛋白质分子结构中均含有许多肽键，其结构与双缩脲分子中的亚酰胺键相同。因此，在碱性条件下与铜离子也能呈现出类似于双缩脲的呈色反应。其反应过程如下： 【试剂】 1 蛋白质溶液（鸡蛋清用蒸馏水稀释10倍， 通过2-3层纱布滤去不溶物） 2. 0.1%的甘氨酸溶液 3. 0.01%精氨酸溶液 4. 10%NaOH溶液 5. 1%CuSO4溶液 6. 尿素结晶 【实验流程】 双缩脲的制备 少许尿素结晶于干燥试管中 注意： (1)尿素结晶不要取多，约火柴头大小。 (2)在