我是怎样治疗犬瘟热-林振国.pptVIP

CDV诊断--病毒的分离鉴定 从自然感染病例分离病毒较为困难。将病料接种于雪貂是通常用的分离方法。发病初期采集淋巴组织；急性病例取胸腺、脾、肺、肝；呈脑炎症状者采集小脑等病料，制成10%乳剂，加适量双抗或微孔滤膜过滤后，腹腔接种1～2周龄或断乳15天的易感幼犬5ml，症状明显，常于发病后2周死亡；或脑内接种易感雪貂0.5～1.0ml，8～12天鼻流水样分泌物，不久变为脓性，眼睑水肿，粘连，嘴边出现水疱和脓疱，脚肿，两趾发红，一般于发病5～6天后死亡，也可将上述病料接种于犬肾原代细胞、鸡胚或纤维细胞或仔犬肺胞巨噬细胞进行分离和鉴定病毒。 CDV诊断--包涵体检查 生前可刮取鼻、舌、瞬膜和阴道粘膜等，死后则刮膀胱、肾盂、胆囊或胆管等粘膜，做成涂片，干燥，甲醇固定，苏木紫和伊红染色，镜检。包涵体呈红色，见于胞浆内，圆形或椭圆形，边缘清晰。 CDV诊断--血清学诊断 中和试验：一般使用鸡胚绒毛尿囊膜及各种组织培养细胞进行中和试验，以检出抗体。中和抗体效价为1∶100或更高时，对Synder Hi11毒株脑内或气雾攻击具有坚强的抵抗力。中和抗体低于1∶20的犬是易感的。中和试验是目前测定免疫力的标准 补体结合试验：可用感染脏器、感染鸡胚绒毛尿囊膜乳剂或感染细胞培养物作为补反抗原进行补体结合试验。病犬感染21～28天后产生补体结合抗体，但以后只持续数周，因而补体结合试验是确诊新近感染病例的一种方法。 酶联免疫吸附试验：是目前检查血清中IgG和IgM抗体较为敏感和特异的方法。Bernard等认为通过蔗糖密度梯度离心提纯CDV抗原是增强其特异性的重要步骤。 血液常规检测 ⑴白细胞总数? 感染犬瘟热后，大多数犬只的白细胞总数呈明显下降趋势；在感染后期仅为正常白细胞总数的1/3 ⑵白细胞分类计数? 大多数犬只在感染5---8天，淋巴细胞分类计数下降而嗜中性细胞分类计数上升。淋巴细胞最底时仅占白细胞总数的3--5％；而嗜中性细胞可高达93--97％。 CDV基本诊断 1，血液常规检查：白细胞分类下显示， 淋巴细胞减少，轻度的中性粒细胞增多 2，犬瘟热试纸诊断：有较高的准确性 注意：有时检查结果为弱阳性，甚至阴性，此时，临床症状应作为临床判断的主要基础 犬瘟热抗原和犬瘟热抗体(IgG)滴度快速检测试纸 什么是快速诊断试纸？ 快速诊断试纸的原理 直接夹心免疫层析法 捕捉的单克隆抗体 – CDV – 检测的单克隆抗体 针对CDV 囊膜F蛋白的单克隆抗体 目的 : 从结膜、血清和尿液中检测犬瘟热病毒 读取时间 : 5-10 minutes 敏感度 : 96.5% vs RT-PCR 特异性 : 97% 和CPV, CCV, ICH, PI2无交叉反应 检测限制 : 101.8TCID50/0.1ml 保质期: 18months CDV快速诊断试纸 测试步骤 Saline solution Swab 滴加4滴 CDV Ag Positive CDV Ag Negative 测试结果 犬瘟热病毒人工攻毒的研究 暴露于气溶型犬瘟热病毒颗粒的犬, 50%死亡. 死亡的犬未产生抗体, 然而耐过者于第9天产生抗体. 特定组织用荧光抗体检测. 在犬暴露于病毒的初期, 病毒被证明只存在于支气管淋巴结和扁桃体内. 第2天和第3天病毒出现在血液中,但是仅在单核细胞内. 在前6天, 病毒在淋巴系统内增值而不在上皮细胞内. 从第6天到第9天, 充满病毒的单核细胞广泛分布并且病毒入侵到所有的上皮组织. 犬瘟热病毒人工攻毒的研究 当此类入侵发生后, 一些特异性临床症状就能被发现， 比如食欲减退、腹泻、结膜炎以及最终出现神经症状. 而在产生抗体并耐过的犬只被证明病毒消失了，除了有些在神经细胞和足垫的表皮细胞内还有病毒. 病毒是否停留在脑部和足垫内，和抗体的出现无关，只是说明一些特殊中枢神经综合征和硬足底经常可见于表面无临床症状的犬只 犬瘟热和免疫 免疫抑制性疾病 活着的和死亡的犬通常都显示胸腺萎缩 存活犬的免疫 - 体液免疫 - IgM : 在感染后10 ~ 20天达到高峰 - IgG : 持续5周 ~ 3个月 - 细胞免疫 - 在感染后10~14天特异性的杀伤性T细胞开始出现 - 在14~21天特异性杀伤性T细胞达到高峰 死亡犬的免疫 - 无体液免疫或者细胞免疫被抑制 CDV临床症状 症状 No. of Dog% 呼吸道 23 46 神经症状 15 30 腹泻