第十七章：植物基因工程.ppt

转化率影响因素： 金属微粒：金粉颗粒比钨粉颗粒性质优良，但价格昂贵； DNA沉淀辅助剂：对DNA在微粒上的黏附有重要作用，但对植物受体细胞也产生一定的伤害； DNA的纯度及浓度； 微弹的速度； 植物材料内在因素。 脂质体介导的基因转化 阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA-脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞作用，偶尔也通过渗透作用，将DNA传递进入细胞。 脂质体也称人工细胞膜，是由脂质双分子层组成，磷脂分子在水中可自动生成闭合的双层膜，从而形成一种囊状物被称为脂质小体。 适用性广，转染效率高，重复性好，转染效果随细胞类型变化大，操作繁琐，技术含量高。 微激光束法 将激光引入光学显微镜聚焦成微米级的微束照射培养细胞，在细胞膜上形成自我愈合的小孔，使加入细胞培养基里的DNA流入细胞，实现基因的转移。 操作简便、工作效率高； 无寄主限制，适应于各种动植物； 对受体细胞生命活动影响小； 受体的类型广泛； 用于细胞器的基因转化。 花粉通道法 将外源DNA片段在自花授粉后的特定时期注入柱头或花柱，外源DNA沿花粉管通道或传递组织通过珠心进入囊胚，转化不具备正常细胞壁的受精卵、合子及早期的胚体细胞。 农杆菌介导法 Ti质粒的遗传特性 章鱼碱型（octopine） 胭脂碱型（nopaline） 农杆菌素碱型（agrop