HPLC方法建立和验证.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * 提 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 体内药物分析 * 三、实验方案（续） 3．血样分析法 血浆样品的预处理 取血浆0.5ml，加内标溶液(10?g/ml诺氟沙星甲醇溶液）50 ?l、乙腈1.0ml，涡旋混合30s，离心5min，取上清液1ml，加二氯甲烷-异丙醇(95:5)混合溶剂5ml，涡旋振荡1min，离心5min，弃去上层水相，吸取下层有机相，60℃下氮气流吹干，残渣加流动相200?l，涡旋溶解30s，离心5min，取上清液20?l进样 第四章 分析方法的建立与验证 第三节 分析方法的验证与要求 * 体内药物分析 * 四、分析方法验证 1．方法特异性 环丙沙星峰tR=12.4min，诺氟沙星(内标物质)tR=10.9min，各峰均获得完全分离，内源性物质峰(与空白血浆样品一致)tR=8.6min对测定无干扰 志愿者用药后的血浆样品色谱图中环丙沙星与内标物质峰与模拟血浆样品中环丙沙星与内标物质峰的tR、T、n和R均一致，峰形相同。故不认为代谢物有干扰 第四章 分析方法的建立与验证 第三节 分析方法的验证与要求 * 体内药物分析 * 四、分析方法验证(续) 2．标准曲线 标准系