第6章基因操作中大分子的分离和2013范例.ppt

总结 ◆ Southern印迹法(DNA印迹法,Southern blotting):是一种把DNA电泳分离区带转移到支持膜上的技术。 ◆ Northern印迹法(RNA印迹法,Northern blotting):Alwine等人将Southern印迹法应用于RNA,原理与Southern印迹法相似。 ◆ Western印迹法(蛋白质印迹法,Western blotting):是一种从混合蛋白质中检出微量特定蛋白质的方法。 ◆ Eastern印迹法(Eastern blotting):也是一种蛋白质印迹法,与Western印迹法不同之处是:先用等电聚焦-聚丙烯酰胺凝胶电泳(IEF)分离蛋白质,然后也是将蛋白质的分离区带、以电驱动转移方式进行了印迹。 一、RNA的S1核酸酶作图:分析原mRNA加工剪接为成熟mRNA中的剪切区段和边界。 二、S1核酸酶作图分析mRNA端点:5’和3’端均可分析。 三、引物延伸法分析mRNA的端点:只能用于5’末端的作图。 第四节 RNA作图和端点分析(自学) RNA的S1核酸酶作图 分析mRNA端点 引物延伸法分析mRNA的端点 第五节 重组DNA分子导入受体细胞 一 选择受体细胞的基本原则 二 重组质粒DNA转化大肠杆菌 基本概念 ● 受体细胞(receptor cell) 又称为宿主细胞或寄主细胞(host cell)等,能

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