第五章亲和层析分离技术重点分析.pptVIP

第五章 亲和层析技术 利用生物大分子之间的专一性识别性或特定的相互作用的分离技术称为亲和层析分离技术 简介——亲和配基 亲和层析的理论 对正常的凝胶过滤色谱而言 亲和层析的理论 亲和层析的理论 实际上，Ve’/Ve很难测定，但在洗脱液中，加入可活性配基或竞争性抑制剂，使固定配基的表边的亲和力降低，其数值可以测得 亲和层析的理论 推导得到 溴化氰法 三嗪法 高碘酸盐法 环氧化物法 苯醌法 其他方法——甲苯磺酰氯 戊二醛法 N6（6-氨己基）氨甲酰-AMP-Sepharose间接偶联法示意图 染料亲和层析 染料亲和层析 染料亲和层析 染料配基和蛋白质作用大小排列 原理 （a）吸附过程；（b）洗脱过程；（c）再生过程 引入硫醇基 引入双硫键 核苷酸及辅酶亲和层析 核苷酸及辅酶亲和层析 核苷酸亲和层析的合成 碳二亚胺直接法偶联 间接偶联法 核苷酸亲和层析的吸附和解吸 5.4.2 固定化金属离子亲和层析 螯和基团和金属离子的选择 亲和层析介质的合成 固定化金属离子亲和层析的 吸附和解吸条件 5.4.3 染料亲和层析 染料亲和层析介质的制备 蛋白质的吸附和解吸 Cibacron Blue F3G-A 结构图 其中R为: Procion Red H-E3B 结构图 Procion b