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2016届淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测概要
* * 1、酶制剂的概念和种类 (一)酶制剂 含有酶的制品 ①定义: 多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶 ②种类: A、液体酶制剂 治疗某些胃病的胃蛋白酶液 B、固体酶制剂 实验6 α—淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂,说明酶制剂使用有很多优点: 催化效率高、低能耗、低污染等。 酶制剂的使用有缺点吗? 2、酶制剂的优点 3、酶制剂的缺点 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活; 2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本; 3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。(难分离) 1、固定化酶: 2、固定化酶技术的优点: (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。 (二)固定化酶 就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 类型 优点 不足 直接使用酶 固定化酶 直接使用酶和固定化酶的优缺点 催化效率高 低耗能 低污染 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,难分离 在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的 难以一次性固定化多种酶 吸附法 包埋法 交联法 共价偶联法 3.固定化酶方法 1、实验原理:本实验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂溶液测试, 流出物呈红色,表明水解产物 糊精 生成 淀粉 α-淀粉酶 糊精 β淀粉酶 葡萄糖 糖化淀粉酶 麦芽糖 这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶,其作用的最适温度为50~75℃;最适PH为5.5~7.5 遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色 (三)实验 2、实验材料制备 (1)a-淀粉酶的固定化 反应柱 固定化酶 气门心 夹子 5ml注射器 (3)5mmol/L KI-I2溶液 (2)可溶性淀粉溶液 P39 3、实验步骤: (1)将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入1~2滴KI-I2溶液,观察颜色.用水稀释1倍后再观察颜色. 反应柱 固定化酶 气门心 夹子 5ml注射器 淀粉 收集流出液,鉴定 (2)实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4℃冰箱中,几天后再重复上述实验,看是否有相同的结果 4、实验结果 * *
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