7药物的体外抗菌活性抗生素效价测定概要.pptVIP

实验内容 一、药物的体外抗菌实验（p277） 二、抗生素效价测定（p288） 一、药物的体外抗菌实验（p277） 琼脂扩散渗透法（滤纸法，已做）。 系列浓度稀释法，测定药物的MIC。 概 念 MIC: 最低抑菌浓度, 药物能够抑制微生物生长的最低浓度；mg/ml或ug/ml为单位。 MBC: 最低杀菌浓度，能杀灭微生物生长的最低浓度；mg/ml或ug/ml为单位。 MIC 和 MBC 哪个浓度要高些？ 平板倍比稀释法 1. 药物倍比稀释（左氧氟沙星/罗红霉素）： 0、10、20、40、80、160ug/ml； 2. 制备平板制备：稀释的药物1ml + 琼脂糖培养基9ml，混匀，混合物制备平板； 3. 菌液点样：用接种环点取菌液（四株大肠杆菌、四株金葡菌），沾到平板培养基相应格中。 4. 培养及观察 二、抗生素效价测定（p288）Biological Assay of Antibiotics 抗生素效价分析：一般用芽孢杆菌，采用微生物学方法测定，包括稀释法，比浊法和琼脂扩散法 琼脂扩散法-管蝶法 (Cylinder plate method)：灵敏度高、能直接显示出抗生素的抗菌活性。 已列入药典。 琼脂扩散法-管蝶法 一剂量法、二剂量法（常用）、三剂量法 二剂量法（又称四点法）：抗生素标准品和检品各稀释成一定浓度比例（2:1或4:1），在同一平板上比较其抗菌活性，根据抗生素浓度的对数和抑菌圈直径来计算检品效价。 双层培养基（底层为琼脂，上层琼脂+枯草杆菌） 四个牛津杯（不能烧烤） Principle: MIC and MBC 系列浓度稀释 Procedures Results and reports 记录MIC值 Strains Drug concentration（μg/ml） MIC (μg/ml) 64 32 16 8 4 2 1 0.5 0 1 - - - - - - - - + MIC≤0.5 2 + + + + + + + + + MIC＞64 3 + + - - - - + - + 操作有误 4 - - - - + + + + + MIC=8 5 6 7 8 注意：计算MIC值时，抗生素的量被稀释了10倍，注意换算！ Procedures UH：检验品高剂量 UL：检验品低剂量 SH： 标准品高剂量 SL： 标准品低剂量 抑 菌 圈 直 径