x生物第五章概要.ppt

基础课时案42　生物技术在其他方面的应用 2016备考·最新考纲 1．血红蛋白的提取与分离。2.从生物组织中提取某些特定成分。3.实验：DNA的粗提取与鉴定。 一、DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理 2．操作过程 材料的选取：选用 含量相对较高的生物组织 破碎细胞(以鸡血为例)：鸡血细胞，加 ，用玻璃棒搅拌，用纱布过滤，收集滤液 去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制 去除杂质 DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、 冷却的体积分数为 溶液 DNA的鉴定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂， 5 min，溶液变成蓝色 易错警示！　(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。 (2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。 (3)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。 深度思考 下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作，请仔细观察并分析①～④操作的目的分别是什么？ ①________________　②________________ ③________________　④________________ 提示　①是使鸡血细胞吸水涨破释放出核物质；②是析出DNA，去除溶于酒精的杂质；③是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中；④是稀释NaCl溶液使其浓度接近0.14 mol·L－1，去除溶于低浓度NaCI溶液的杂质。 二、PCR技术的基本操作和应用 1．PCR原理 DNA 原理，即： 2．PCR反应过程 (1) ：当温度上升到 以上时，双链DNA解旋为单链。 (2) ：温度下降到 左右时，两种 通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 (3) ：温度上升到72 ℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在 的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 三、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理 2.血红蛋白的提取和分离过程 深度思考 1．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为①～④中的哪一种？ 提示　②，分子质量较大者先洗脱出来，分子质量较小者后洗脱出来。 2．如图所示装置可用于血红蛋白提取、分离的哪种过程？其原理是什么？烧杯内a溶液是蒸馏水吗？ 提示　该装置为透析装置，由于透析袋是用硝酸纤维素制成的小分子可自由进出，而大分子保留在袋内，故可用于除去小分子杂质，烧杯中的a溶液应为20 mmol·L－1的磷酸缓冲液，不可使用蒸馏水。 四、植物有效成分的提取 1．植物芳香油的提取 (1)提取玫瑰精油实验 ①方法： 。 ②实验流程 (2)提取橘皮精油的实验 ①方法：一般用 。 ②实验流程 石灰水浸泡→漂洗→ →过滤 　　　　　　　　　　 橘皮油←再次 ←静置 2．胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素的性质：不溶于 ，微溶于乙醇，易溶于 等有机溶剂。 (2)实验设计 ①方法：萃取法， 最适宜作萃取剂。 ②实验流程 胡萝卜→粉碎→ →萃取 　　　　　　　　 胡萝卜素←浓缩← (3)鉴定方法： 法。 考点一　DNA和蛋白质技术　 [典例引领] 【典例1】 (2014·江苏单科，16)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，错误的是 (　　) A．酵母和菜花均可作为提取DNA的材料 B．DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水 C．向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物 D．DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝 解析　理论上只要含DNA的生物材料都行，只是从操作难易程度上分，最好选择容易操作的，所以酵母和菜花可作为提取DNA的材料，A正确；DNA在2 mol/L NaCl溶液和蒸馏水中都能溶解，只不