第七章 PCR生物化学课件.pptVIP

第七章 PCR技术 PCR技术 PCR的基本原理 PCR的类型 PCR技术的应用 DNA的复制 PCR的基本原理 PCR是由引物介导，聚合酶催化底物，在体外进行特异DNA扩增的一种方法。 全过程分为三步： 变性 退火 延伸 PCR的基本原理 PCR反应体系 PCR过程 PCR的特点 可以是DNA，也可以是RNA 可以是粗制品 很强的耐热稳定性 最适温度为75～80 ℃ 无3’ 5’外切核酸酶活性，错配率为1／7500 发挥活性需要Mg2+ 具有反转录活性 100ul反应液中加入1～2.5uTaq聚合酶为宜 保存温度小于－20 ℃ Tris-HCl缓冲液（pH7.5），稳定pH值。 MgCl2(Mg2+) ：直接影响反应的特异性和产率。 PCR的基本原理 PCR反应体系 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应体系 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应体系 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR