临床免疫学免疫组织化学技术.docVIP

第十二章　免疫组织化学技术免疫组织化学技术是指组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，借助可见的标记物。对相应抗原或抗体进行定位、定性或定量检测。其原理仍是抗原抗体的反应，应用酶标记物通过酶与它底物间的组织化学反应生成不溶性颜色产物，用显微镜在细胞或亚细胞水平上观察抗原或抗体的存在、定位及分布。　　 第一节　免疫组织化学技术要点 　　　　一、标本的处理　　（一）标本主要来源　　组织标本主要取之于活组织检查标本、手术切除标本、动物模型标本以及尸体解剖标本等。前三者均为新鲜组织，后者是机体死亡2h以上的组织，可能有不同程度的自溶，其抗原可能有变性消失，严重弥散现象，因此，尸检组织应尽快固定处理，以免影响免疫组化标记效果。但有些较稳定性抗原，如HBsAg、HBcAg等在尸检标本中，抗原显示仍较好。　　组织标本的取材常常受到各种因素的影响，如各种内窥镜钳取的组织，常因过度挤压而变形，严重者组织结构被破坏。大组织标本病变分布广泛，抗原在组织中分布不均一，常出现人为的组织取材不准确。为了避免上述缺点，组织取材时应注意：①活检钳的刃口必须锋利，以免组织受挤压；②取材部位必须是主要病变区；③必须取病灶与正常组织交界区；④必要时取远距病灶区的正常组织作对照。　　（二）标本的固定与保存　　为充分保存组织的抗原性，标本离体后应立即作处理，或立即速冻成冻块进行冰冻切片，或立即用固定