08-2核酸.pptVIP

* 12.10 在体外双链DNA和RNA可以变性和复性 一个DNA双螺旋可以彻底地解链，分离成两条互补的单链，这一现象称为DNA变性。变性只发生在体外。 慢慢地升高DNA溶液的温度，随着温度的升高，碱基对之间的氢键被破坏，越来越多的碱基对被拆开，当DNA的溶液被加热到一定温度以上时，双链DNA结构被破坏，最后双链完全分开，形成两个单链。 变性分开的两条单链可以重新形成双螺旋DNA，这是变性的可逆过程，称为复性。 核酸复性时，紫外吸收降低，由于核酸复性而引起紫外吸收降低的现象，称为减色效应。 由于核酸变性而引起紫外吸收增加的现象，称之增色效应。 在260nm波长的单链DNA的吸收要比双链DNA的吸收高12~40％，这是因为双链DNA中堆积的碱基对之间相互作用降低了吸收。 由于核酸变性而引起紫外吸收增加的现象，称之增色效应。 吸收值变化对DNA溶液温度的曲线称之DNA融解曲线。由双螺旋到变性状态之间的陡变区反映了双螺旋DNA中堆积的、形成氢键的碱基对的破坏程度。 陡变区中点对应的温度称为熔点（Tm），在熔点处，有一半的双链DNA变成了单链DNA。有机溶剂，如乙醇可以降低DNA的Tm，因为有机溶剂可以降低分子内部的疏水相互作用强度。一些离液剂，如尿素、盐酸胍和甲酰胺也