【富萜樟芝】樟芝對肺癌的作用.docxVIP

PAGE 156 PAGE 156 樟芝的現代研究 第四章樟芝的抗癌作用 PAGE 第四章 樟芝的抗癌作用 PAGE 152 樟芝对肺癌的作用 肺癌起源于支气管粘膜上皮，局限于基底膜内者称为 原位癌肿，可向支气管腔内或 / 和临近的肺组织生长，并可 通过淋巴血行或经支气管转移扩散。绝大多数肺癌是恶性上 皮细胞肿瘤，就是上皮细胞的恶性肿瘤。根据癌细胞在显 微镜下组织学上的大小和外观，肺癌主要分为 小细胞肺 癌＂(16.8%）和 非小细胞肺癌＂（80.4%）。 图 10 肺癌细胞 肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威 胁最大的恶性肿瘤之一。近 50 年来许多国家都报导肺癌的发 病率和死亡率均明显增高，2012 年中国肺癌新发病例 60 万 人，死亡约 49 万人。男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性 肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。对 于肺癌这一难题，各界人士皆花费大量的人力和财力进行攻 坚。经过大量的努力，证实了樟芝可以有效的抑制肺癌细胞 的发展。 Hung Wu 等（2006）通过蛋白质组学分析对樟芝提取物 作用于人肺癌 A549 细胞的效果进行了研究。研究证明 0.2- 2% 的固态培养樟芝（SACE）的乙醇提取物可以有效地抑制 人非小细胞肺癌 A549 的增殖，但对正常的人肺成纤维细胞 MRC5 的增殖无影响。其中，细胞凋亡分析显示，通过对内 质网应激反应的诱导，SACE 可引起 A549 细胞的凋亡；通 过 PDUQEST 软件对经 SACE 处理的 A549 细胞和未经处理 的 A549 细胞蛋白进行二维凝胶图谱的分析，发现两种细胞的 凝胶图谱中有五个显著差异的蛋白斑点，后经蛋白印记实验 证实这五种蛋白分别是人 galectin-1、人真核细胞翻译起始因 子 -5、人 Rho GDP 分离抑制因子、人钙依赖性蛋白酶小单元 和人膜联蛋白 V。这些实验结果表明 SACE 能够影响癌症细 胞中基因的表达。 Yu-Yi Chan 等（2010）采用溶剂提取法对樟芝里的活性 成分进行提取，并用高效液相色谱将有效成分进行了分离， 并将分离出的部分作用于人肺癌 A549 细胞。结果显示，用 HPLC 分离出的 5-7 部分对 A549 细胞有较强的增殖抑制作用 （如图 11），其中 Fr-6 的作用效果最强。凋亡测定表明， Fr-6 可触发 A549 细胞中与细胞凋亡相关的线粒体途径和内质 网状应激反应。免疫印迹结果表明，Fr-6 可通过降低细胞增 殖过程中依赖的 calpain 1/2 小单元和 Fr-6-mediated 的水平， 而使 ER 应激反应被启动，这些反应使 Erk 1/2 途径受到抑制， 而以上反应均与 Fr-6 使 A549 细胞中 galectin-1 的表达减少有 关。Fr-6 还能削弱与细胞凋亡相关的 Rho GDP 分离抑制剂的 表达及 c-Jun NH2-terminal 激酶途径的启动。另外，Fr-6 也可 降低真核翻译起始因子 5 的水平。以上实验结果表明，樟芝 可以通过调节癌细胞中的代谢产物，进而通过各种途径诱导 细胞凋亡。 图 11 经 HPLC 分离出的樟芝活性成分 Jeng-Feng Chiou 等（2011）分别通过体外和体内试验对 樟芝的乙醇提取物（ACAE）作用于非小细胞肺癌 H441GL 的 作用效果进行了考察。结果显示，ACAE 对 H441GL 细胞的 增殖和迁移 / 入侵会产生剂量依赖性抑制。ACAE 可阻滞细胞 周期循环，并停滞于 G0/G1 期。而且，通过流式细胞分析图、 Annexin-V 免疫荧光试验和 DNA 碎片测定，发现 ACAE 可以 诱导 H441GL 发生细胞凋亡。体内生物荧光成像结果显示， 经 ACAE 处理后的细胞，可以明显的推迟肿瘤发生的时间。 基于以上实验数据，ACAE 具有抗癌特性，可作为一种潜在 的抗癌药物。 Ying-Yi Chen 等（2012）通过实验证实樟芝子实体的乙 醇提取物（EEAC）可以对 CL1-0 细胞的迁移能力 ( 如图 12） 和活性产生依赖性抑制作用。明胶酶谱分析结果显示，EEAC 可以对金属蛋白酶 (MMP)-2 和 MMP-9 的活性产生浓度依赖 性抑制。免疫印迹实验发现，樟芝不但可以减少 (MMP)-2 和 MMP-9 蛋白的表达，同时使内源性抑制蛋白 MMP (TIMP-1 和 TIMP-2) 的表达有所增加。另外，实验发现，从樟芝中分 离出来的两种化合物 codycepin 和 zhankuic A 可以单独或联 合对 (MMP)-2 和 MMP-9 的表达产生抑制。通过进一步的实 验发现，樟芝可以抑制 p38 和 JNK1/2 的磷酸化，还可以抑制 PI3K 的表达及