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人參皂甙单体Rh_2对人脑胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响及其机制探讨
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山东医药 2010 年第 50 卷第 22 期
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16
HYPERLINK / ? 1994-2011 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
人参皂甙单体 Rh 2 对人脑胶质瘤细胞 U251
增殖和凋亡的影响及其机制探讨
张继全 ,邱建武 3 ,关 宁 ,张晓健 (辽宁医学院 ,辽宁锦州 121001)
摘要 :目的 观察人参皂甙单体 Rh2 ( GS2Rh2 )对人脑胶质瘤 U251细胞增殖和凋亡的影响 ,并探讨其机制 。方 法 用 GS2Rh2 处理人脑胶质瘤 U251 细胞 ,采用 MTT法检测 U251 细胞增殖抑制率 ,流式细胞仪和 Annexin V 2 F ITC / P I双染法观察 U251细胞凋亡情况 , TRAP2EL ISA 法检测 U251细胞端粒酶活性 , RT2PCR 法检测 U251细胞人 端粒酶逆转录酶 ( hTERT) mRNA的表达 。结果 5、10、20、40、80 μg/m l GS2Rh2 组 U251 细胞增殖抑制率分别为
20. 42%、32. 19%、45. 09%、57. 37%、73. 82%。根据细胞增殖抑制曲线计算出 IC30 、IC50 、IC70值分别为 9. 7、25. 2、
68. 4μg/m l。 F ITC和 P I荧光双参数点图显示实验组细胞分布区域与对照组相比出现明显改变 ,随着药物浓度的 增加 ,早期凋亡 、晚期凋亡或坏死的区域细胞数量逐渐增多 。9. 7、25. 2、68. 4μg/m l GS2Rh2 处理 12、24、48、72 h 后 U251细胞端粒酶活性随 GS2Rh2 浓度增加和作用时间的延长而降低 。浓度为 25. 2 μg/m l GS2Rh2 作用 24、48、72 h 的 U251细胞 hTERT mRNA与 β2actin灰度值比为 0. 964 9 ±0. 004 2、0. 401 8 ±0. 001 4、0. 297 8 ±0. 001 8,对照组
为 0. 976 4 ±0. 005 1。作用 48、72 h U251 细胞 hTERT mRNA 与 β2actin灰度值比与对照组相比 P 均 0. 05;作用 48、72 h者相比 P 0. 05。结论 GS2Rh2 能够诱导人脑胶质瘤 U25 l细胞凋亡 ,抑制 U25 l细胞增殖 。其机制与其抑
制 hTERT基因表达 ,降低端粒酶活性有关 。
关键词 :人参皂甙单体 Rh2 ;胶质瘤 ;细胞增殖 ;细胞凋亡 ;端粒酶 ;人端粒酶逆转录酶
中图分类号 : R739. 41 文献标志码 : A 文章编号 : ( 2010) 2220016203
Effe c t and m echan ism o f g in seno s ide 2R h2 o n hum an g liom a U 251 ce ll p ro life ra tio n a nd apop to s is
ZHANG J i2quan, Q IU J ian 2w u, GUAN N ing, ZHANG X iao2jian (L iaoning M edical University, J inzhou 121001, P. R. China)
Abstract: O bjective To observe the effect and mechanism of ginsenoside2Rh2 ( GS2Rh2 ) on hum an gliom a U251 cell
p roliferation and apop tosis. M ethods Hum an gliom a U251 cells were treated with GS2Rh2 , the inhibitory effect was exam2 ined with MTT. Staining with Annexin V 2F ITC / P I and flow cytometry analysis were used to detect the apop totic cells. TRAP2EL ISA was used to detected telom erase activity and RT2PCR was used to detect the exp
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