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生物技术实践专题 ——微生物的培养与应用 主讲教师：毕诗秀 一、基础知识 1.微生物的概念[来源:学科网] 2.培养基 ⑴什么是培养基？ ⑵培养基中所含的营养物质 ⑶培养基的种类 菌操作技术 实验室常用的消毒和灭菌目的及方法 无菌技术 目的 具体方法 消毒 用较温和的物理、化学方法杀死物体表面或内部一部分有害的微生物——营养体 （不包括芽孢和孢子） 高温煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂消毒（酒精、消毒水等） 灭菌 用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢（休眠体）和孢子（繁殖体） 高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌 干热灭菌 熏蒸灭菌 紫外线照射灭菌 细菌过滤器 4.微生物实验操作 ⑴制备培养基 ⑵微生物接种方法 1.平板划线法： [来源:学,科,网][来源:Zxxk.Com] 2.稀释涂布（平板）法 菌落数30~300个/平板为宜 测得的活菌数比实际数可能偏小 二、具体实验课题 ㈠大肠杆菌的培养和分离 1.LB培养基配方：（固体和液体培养基） 蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，（15g琼脂）加水定容至1000ml 2.实验流程 3.实验结果观察和分析 ⑴观察平板划线法获得的单菌落 ⑵观察液体培养基的浑浊度 ⑶显微镜下观察经革兰氏染色的大肠杆菌 总结微生物培养的基本程序 ㈡土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.实验原理 [来源:Z§xx§k.Com] [来源:学#科#网] 2.培养基 LB全营养细菌培养基配方： 蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂糖 尿素培养基配方： 葡萄糖、NaCl 、K2HPO4