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微生物检验比对考核的检验思路探讨 作者： HYPERLINK /florilegium.asp?a_name=李义强a_id=0 \t _blank 李义强?? 来源：本站?? 发布时间：2006-4-2 8:39:48??点击数： 字号选择〖? HYPERLINK javascript:ContentSize(16) 大 HYPERLINK javascript:ContentSize(14) 中 HYPERLINK javascript:ContentSize(12) 小?〗 核心提示：　　【摘要】?目的??探讨微生物检验比对考核的检验思路。?方法??以2005年广东省疾病预防控制中心组织的微生物实验室间比对试验为例，对3号项目考核样品使用现行有效的微生物检验技术规范和相关传染病诊断标准进行鉴定。?结果??根据组织单位提供的已知提示，并充分利用自己的已知知识， 　　 李义强?? ?中华医药杂志 2005年8月 第5卷 第8期 　　【摘要】 目的? 探讨微生物检验比对考核的检验思路。 方法? 以2005年广东省疾病预防控制中心组织的微生物实验室间比对试验为例，对3号项目考核样品使用现行有效的微生物检验技术规范和相关传染病诊断标准进行鉴定。 结果? 根据组织单位提供的已知提示，并充分利用自己的已知知识，尽量缩小范围，检出3号项目考核样品是宋内志贺菌Ⅰ相和福氏志贺菌2a型的混合菌株。 结论? 参加微生物检验比对考核时要充分利用已知知识进行检验，并要留意样品是纯菌株还是混合菌株。?????? 　　【关键词】? 比对考核;宋内志贺菌Ⅰ相;福氏志贺菌2a型;混合菌株;纯菌株 　　在微生物检验中，无论是日常工作或是比对考核，如果不知菌株来源，即不知菌株采集于人体何部位，采集于何种食物、使用物品或环境时，对未知菌株的分离鉴定，目前没有固定的检验程序 ［1～4］ ，只有在确定了菌株的来源或针对性要检验某个可疑菌属，才有相关来源菌的检验流程 ［1］ 或相关菌属的检验程序 ［2］ 。微生物检验比对考核一般说明菌株来源或指明了某一方向，对未知菌株进行鉴定时可以根据这些提示来缩小检验范围。下面以2005年广东省疾病预防控制中心组织的微生物实验室间比对试验为例，探讨微生物检验比对考核的检验思路。对3号项目考核样品进行检验，检验思路和检验结果如下。 　　1 对象、试剂、仪器和方法???? 　　1.1 对象 广东省疾病预防控制中心提供的比对考核3号项目考核样品。??? 　　1.2 试剂 各种微生物检验用染色液试剂、增菌培养基试剂、分离培养基试剂、生化试验试剂和鉴定血清试剂。 　　1.3 仪器 生化培养箱、冰箱、显微镜。??? 　　1.4 方法 《全国临床检验操作规程》（第2版）-1997;《食品卫生微生物学检验》GB/T4789.1～31-2003;《传染病诊断标准及相关法规汇编》-2003。 　　2 检测思路和检测结果???? 　　2.1 样品来源及样品性状 广东省疾病预防控制中心提供的微生物实验室间比对项目的3号项目样品，是从1例急性肠道传染病病人粪便中分离出的肠道致病菌培养物，属需氧或兼性厌氧菌。该样品为子弹管装冻干粉剂菌株，样品运送温度为常温。??? 　　2.2 检测思路 从已知条件来看，从需氧状况看，该菌株属需氧或兼性厌氧菌可以排除厌氧菌;运送温度为常温，说明该菌株是中温菌，可以排除嗜冷菌、嗜热菌;该菌株来源于1例急性肠道传染病人的粪便，说明该菌株为肠道菌，而且是致病菌，可引起急性致病，可以排除肠道正常菌群和肠道条件致病菌。根据《全国临床检验操作规程》（第2版）-1997提供的粪便标本中常见的病原菌种类，不是厌氧菌的革兰阳性菌有:金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌、白色念珠菌;革兰阴性菌有伤寒及其它沙门菌、志贺菌、致病大肠埃希菌、弧菌属菌种、气单胞菌种、邻单胞菌、小肠结肠炎耶尔森菌、弯曲菌。鉴定时可以将范围缩至这11种菌，培养基可以选择这11种菌的增菌培养基和分离培养基。在选择增菌培养基和分离培养基时，要充分考虑各种类型的常用培养基和专用培养基。 　　2.3 培养、观察和鉴定??? 　　2.3.1 复苏培养 由于该样品为子弹管装冻干粉剂菌株，无法直接涂片镜检，必须进行复苏培养。用接种环挑取冻干粉剂菌株分别接种于营养肉汤中，36℃分别培养6h;接种于加有血清的布氏肉汤中，43℃微需氧培养8h。??? 　　2.3.2 接种 挑取—接种环于营养肉汤分别直接划线接种于一块普通琼脂平板和一块血琼脂平板中，36℃培养24h。同时接种普通琼脂平板和血琼脂平板，除可以观察菌落形态特征外，还可以互相对比观察该菌的营养要求、色素及溶血性等。??? 　　2.3.3 增菌培养 吸取生长良好的营养肉汤培养物0.5ml接种于下列增菌液:碱胨