2013-3-3文献案例分析.ppt

ACC(Adenoid cystic carcinoma):腺样囊性癌，是人类唾液腺中较常发生的恶性肿瘤。同样在乳腺，子宫颈以及气管支气管树等组织中也有发生。 这类肿瘤的组织结构有特异性（腺样【筛孔】型、管状型和实性【基底细胞样】型），长期预后不良，特别是高的复发率以及远处转移。 80%-90%的患者在诊断后10-15年内死亡，而且在过去的几十年中，手速切除并没有降低死亡率。 作者认为对于ACC治疗的难度大，预后差等原因是因为缺乏对肿瘤发生的分子机制的认知。 机制图 * * * 槲皮素能够使得细胞发生凋亡，作者就考虑这种凋亡的发生是否与凋亡蛋白caspase有关联呢？ 所以作者就检测了casepase的表达。 c,d二图证实了槲皮素诱导凋亡是通过线粒体途径的，所以作者就检测了于线粒体凋亡途径的相关蛋白的表达， 为了更加直观的证明槲皮素抑制NF-KB的核转移。作者做了免疫荧光 所以作者就猜想槲皮素诱导凋亡可能是通过PI3K/AKT/IKKa作用旁路的， 为了检测线粒体凋亡途径后面的槲皮素诱导凋亡的分子机制，作者检测了NF-KB相关的通路， 为了进一步证实相关作用，作者用了一个PI3K特异性抑制剂 LY294002 Origin:Apoptosis (2010) 汇报人：翁碧霞 2013-03-10 Activation of PI3K/Akt/IKK-a/NF- kB signaling pathway is required for the apoptosis-evasion in human salivary adenoid cystic carcinoma: its inhibition by quercetin Background 槲皮素 槲皮素 抗肿瘤 冠心病高血压辅助治疗 氧化剂， 天然染料 慢性支气管炎 Background— ACC(Adenoid cystic carcinoma) 肿瘤细胞排列呈圆形、卵圆形或不规则形的上皮团块，其间含有大小不等的囊性腔隙，呈“筛孔”状，与藕的横断面相似 腺样 （筛孔）型 导管样结构为二三列细胞所组成，内层为立方状衬里上皮，外层为胞浆呈空泡状或透明的肌上皮细胞，形成真性腺样腔隙 管状型 瘤组织中除见有上皮细胞构成的实性团片外，尚见有筛孔状或小条索结构 实性（基底 细胞样）型 Background— ACC(Adenoid cystic carcinoma) 腺样（筛孔）型 管状型 实性（基底细胞样）型 Experiment and result-- cyctotoxicity and induce apoptosis 1、Quercetin exerts cytotoxicity against ACC cells——MTT。 2、Quercetin induces apoptosis in ACC cells—— Hoechst 33258，Cell Death Detection ELISA 。 Experiment and result-- cyctotoxicity and induce apoptosis 流式细胞术检测周期和凋亡。 Experiment and result-- cyctotoxicity and induce apoptosis 诱导caspase3,caspase9的激活，但不见诱导caspase8的激活——猜想槲皮素诱导细胞凋亡的过程是通过线粒体依赖的途径。 Cyto c Apaf-1 caspase-9 caspase-3 Apoptosis 外界刺激 Pro-caspase8 caspase8 activite downsterm pathway 线粒体 Experiment and result-- quercetin is probably through a mitochondria-dependent pathway 电位染色法：带绿色荧光的细胞为线粒体去极化细胞 ELISA法：Cyto c是线粒体凋亡的标志物。 Quercetin increases Bax/Bcl-2 ratio and cleaved PARP level Experiment and result-- quercetin is probably through a mitochondria-dependent pathway 数据显示：槲皮素抑制了NF-KB的核转移，减少了IKKa的磷酸化，增加了IKBα的表达，但对p-IKKβ没有作用。 Experiment and result-- quercetin is probably through a mitochondria-dependent pathway