真核生物基因表達的调控81446.docVIP

课次：19 教学目的：使学生了解真核基因表达调控的特点、转录前的调控，掌握增强子的作用特点和反式作用因子的DNA结合域的结构花式。 重点：增强子和反式作用因子的DNA结合域的结构花式。 难点：反式作用因子的DNA结合域的结构花式。 复习旧课：提问2人，了解教学效果。 导入新课： 第八章 真核生物基因表达的调控 第一节 概述 真核生物细胞中由核膜将核和细胞质分隔开，转录和翻译并不偶联；基困组是由多条染色体组成。 真核基因的调节分为： 真核基因表达调控的特点： 第二节 转录前的调控 一.?? DNA的甲基化与去甲基化 真核DNA中的胞嘧啶约有5%被甲基化为5-甲基胞嘧啶(5-methylcytidine,m5C)，而活跃转录的DNA段落中胞嘧啶甲基化程度常较低。 甲基化可使基因失活，去甲基化又可使基因恢复活性。 二 染色质结构对真核基因转录的调控 1.染色质结构影响基因转录　 常染色质中的基因可以转录，异染色质(heterochromatin)，无基因转录表达。 2. 组蛋白的作用　 组蛋白扮演了非特异性阻遏蛋白的作用， 非组蛋白成分起到特异性的去阻遏促转录作用。 核小体结构影响基因转录。 三 基因重排和基因扩增对基因表达的影响 基因重排(gene rearrangement)，即原胚性基因组中某些基因会再组合变化形成第二级基因。 基因扩增(gene amplification)，即基因组中的特定段落在某些情况下会复制产生许多拷贝。 基因丢失：在细胞分化过程中，丢掉某些基因而去除其活性。例如某些原生动物，线虫、昆虫、甲壳类动物，体细胞常丢掉部分或整条染色体，只保留将来分化产生生殖细胞的那套染色体。例如在蛔虫胚胎发育过程中，有27％DNA丢失。在高等动植物中，尚未发现类似现象。 第三节 真核基因转录水平的调控 1 顺式作用元件 (cis-acting elements) 顺式作用元件：对基因表达有调节活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因；通常不编码蛋白质，多位于基因旁侧或内含子中。 1.1 启动子 (1) 核心启动子成分，如TATA框； (2) 上游启动子成分（UPE），如CAAT框，GC框，八聚体（octamer）等； 表 哺乳动物RNA PolⅡ启动子上游转录因子结合的序列元件 ?组件 保守顺序 DNA长度 结合因子 大小（Da） 丰度（/细胞） 分布 TATA box TATAAAA ～10bp TBP 27,000 ? 普遍 CAAT box GGCCAATCT ～22bp CTF/NF1 60,000 300,000 普遍 GC box GGGCGG ～20bp SP1 165,000 60,000 普遍 Octamer ATTTGCAT ～20bp Oct-1 76,000 ? 普遍 Octamer ATTTGCAT 23bp Oct-2 52,000 ? 淋巴细胞 KB GGGACTTTCC ～10bp NFKB 44,000 ? 淋巴细胞 KB GGGACTTTCC ～10bp H2·TH1 ? ? 普遍 ATF GTGACGT ～20bp ATF ? ? 普遍 1.2 增强子 Enhancer又称远端上游序列（far upstream sequence）。 最早SV40病毒中发现，可使旁侧的基因转录提高100倍。组成：100-200bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 正性调控元件 增强子的作用特点： ① 促进基因的转录效率远距离发挥作用 (100~500bp，10Kb) ② 促进转录，不具有启动子专一性 ③ 功能与方向、位置无关 ④ 具有组织或细胞特异性 1.3 沉默子 silencer 负性调控元件，与转录因子结合抑制转录。 作用特点： 不受序列方向的影响， 能远距离发挥作用， 并可对异源基因的表达起作用。 2 反式作用因子（trans-acting factors） 反式作用因子：通过扩散自身表达产物（酶、调节蛋白）控制其他基因的表达，其编码基因与其识别或结合的靶序列不在同一个DNA分子上。 转录因子(transcription factor)：起正调控作用的反式作用因子。 2.1 TF的分类： (1)??通用转录因子，在一般细胞中普遍存在， 主要识别一些启动子的核心启动成分TATA框，如TBP； 上游启动子成分CAAT框，如CTF/NF-1； GC框如SP1； 识别八聚体核苷酸的Oct-1等； (2) 特异转录因子：特殊组织与细胞中的，如淋巴细胞中的Oct-2 ； (3) 诱导型因子：和特异调控序列结合。 2.2 TF结构特征 DNA结合域，binding domain，BD：100aa， 大沟 转录激活域，active domain，