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- 2016-11-28 发布于重庆
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选修3-12基因工程的基本操作程序
专题1 基因工程 一、目的基因的获取 1、目的基因: 2、获取目的基因的常用方法? (1)从基因文库中获取 (2)利用PCR技术扩增 (3)人工合成 (1)从基因文库中获取目的基因 结果 酶 场所 解旋方式 不同点 条件 原料 原理 相同点 DNA复制 PCR技术 PCR技术扩增与DNA复制的比较 碱基互补配对 四种脱氧核苷酸 模板、能量、酶 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 体外复制 细胞核内 热稳定的DNA聚合酶 细胞内的DNA聚合酶 大量的DNA片段 形成整个DNA分子 三、将目的基因导入受体细胞 转化: 目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 方法 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——感受态细胞 1. 将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 (1)农杆菌转化法 ②原理: Ti质粒上的T-DNA可以转移到受体细胞,并整合到受体细胞染色体的DNA上。 ①特点: 易感染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力。 ③转化过程: Ti质粒 目的基因 构建 表达载体 导入 植物细胞 插入 植物细胞染色DNA 表达 新性状 转入 农杆菌 基因枪法又称微弹轰击法,是利用压缩气体产
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