人参皂苷Re提取分离和鉴定.pptVIP

Company LOGO 人参皂苷Re的提取分离与鉴定 天然药物化学教研室 一、实验目的 1 2 3 要求提取分离人参皂苷Re； 掌握大孔树脂法提取人参皂苷的操作程序； 学习薄层层析在皂苷检识中的应用。 二、实验原理 果汁中含脂溶性杂质，用乙醚脱脂后，利于水溶性皂苷在树脂上的吸附，籍此提取皂苷，且利用Re溶于热乙醇，在冷乙醇溶解度小的特点析出Re，与其它成分分离。 1．人参果汁总皂苷的提取 人参果肉50g 150ml水温浸（70℃，1hr），抽滤 滤液1 果肉 合并，通过大孔吸附树脂D4020柱① ； 水洗至无糖反应② ； 90%乙醇（800~1000ml）洗脱③ 。 回收乙醇 乙醇提取物（人参粗总苷A） 100ml水温浸（70℃，30′），抽滤 滤液2 果肉 乙醇洗脱液 三、实验方法 2．人参皂苷Re的制备 取4/5量的乙醇提取物 少量展开剂2°溶解； 上样于硅胶H（40g）柱 展开剂1洗脱，每30ml为一流份收集 Re粗晶B TLC检测，合并Re单一斑点的流份 回收洗脱液至小体积（约20—30ml） 放置、析晶 95%乙醇重结晶 Fr1 Fr2 Fr3 …… Fr13 Re纯品C 注：①树脂柱用前需经无水乙醇处理； ②可用α—萘酚糖反应检测，实际中可目测，至 水洗液颜色变浅至清即可； ③洗脱时，自紫色带即将流出时，开始收集洗脱 液。收集1200~1500ml ④需半周时间； ⑤可用回流装置中脱色半小时。 Liebermann-Burchard反应：取果汁1ml，加等量乙酸酐，滴加1滴浓硫酸,变成紫红色。 取果汁1~2ml于试管内，激烈振摇，如产生多量蜂窝状泡沫，放置10分钟以上，泡沫不明显减少，示有皂苷成分。 1)展开剂：1°氯仿：甲醇：乙酸乙酯：水（2：2：4：1，下层） 2°氯仿：甲醇：水（65：35：10，下层） 2)显色剂：5%硫酸乙醇溶液（110℃以上加热5分钟）显红色、紫红色斑点 。 四、鉴定 1．泡沫实验 2．显色反应 3．薄层层析 五、思考题 1 1. 层析结果如何？若想进一步得到Re纯品应怎样程序处理？ 2 2. 根据皂苷性质、自行设计一种自人参根中提取总苷及皂苷单体分离的方案。 学习动物精神 11、机智应变的猴子：工作的流程有时往往是一成不变的，新人的优势在于不了解既有的做法，而能创造出新的创意与点子。一味 地接受工作的交付， 只能学到工作方法 的皮毛，能思考应 变的人，才会学到 方法的精髓。 学习动物精神 12、善解人意的海豚：常常问自己：我是主管该怎么办才能有助于更好的处理事情的方法。在工作上善解人意， 会减轻主管、共 事者的负担，也 让你更具人缘。 Company LOGO