3、细胞生物学研究方法.ppt

一种蝉(Platypleura kaempferi)的有丝分裂核型 人类G带染色,G带显示的是染色体上富含AT的区域 6P22.3的命名。 人类Q带核型,Q带显示的带纹与G带相似 人类C带核型,C带显示的是着丝粒异染色质 * * * PCR(聚合酶链式反应) PCR的原理 二 外源基因的上调和下调技术 (一).外源性基因在细胞中的过表达是上调基因表达的主要方式 过程: mRNA 反转录 cDNA PCR扩增 外源基因DNA片段 插入到 克隆载体 克隆载体 限制性内切酶酶切 外源基因DNA片段 插入 具有启动子的表达质粒 通过脂质体包裹带有外源基因的表达质粒并转染到细胞中 或通过携带有外源基因的病毒感染细胞而将外源基因带入到 细胞中 外源基因在表达载体的启动子的驱动下而在细胞中过表达 (二)RNA干扰技术是下调基因表达的常用方法 siRNA 原理:与microRNA对靶基因的抑制类似 目的蛋白 被筛选蛋白 被筛选蛋白 编码基因 与衣壳蛋白融合的被筛选蛋白 展示在噬菌体表面 展示不同被筛选蛋白的噬菌体文库 噬菌体衣壳蛋白 编码基因 四、蛋白质与核酸相互作用的研究技术 (一)染色质免疫沉淀 (ChIP) 技术研究DNA与

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