08第8章蛋白质的鉴定.pptxVIP

蛋白质化学第二部分 蛋白质的纯化与鉴定第 五 章 原材料预处理技术第 六 章 沉淀法第 七 章 柱层析技术第 八 章 蛋白质的鉴定第 九 章 综合分析第8章 蛋白质的鉴定8.1、电泳技术8.2、蛋白质定量分析技术8.1、电泳技术8.1.1、电泳概述8.1.2、聚丙烯酰胺凝胶电泳8.1.3、变性聚丙烯酰胺电泳8.2.4、等电聚焦电泳8.1.1、电泳技术概述电泳（electrophoresis，EP）带电粒子在直流电场的作用下，向着与其电性相反的电极方向移动，这种现象称之为电泳。电泳技术就是根据各种带电粒子在电场中迁移速度的不同而对物质进行分离的一类实验技术。凝胶电泳的支持介质采用支持介质的目的:防止电泳过程中的对流和扩散，以使被分离的成分得到最大分辨率的分离。支持介质应具备的特性:化学惰性；不干扰大分子的电泳过程；化学稳定性好，均匀；重复性好；电内渗小等。固体支持介质分为两类：一类是如纸、醋酸纤维素薄膜、硅胶、矾土、纤维素等；另一类是淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶。聚丙烯酰胺凝胶（Polyacrylamide gel，PAG） 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺（Acr）和交联试剂N， N-甲叉双丙烯酰胺（Bis）在有引发剂和增速剂的情况下聚合而成的。 聚丙烯酰胺的特性，包括其机械性能、弹性、透明度、黏着度以及孔径大小均取决于两个重要参数T和C