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- 2016-11-29 发布于重庆
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07HLA分型
PCR-SSP检测 HLA -B27 一、实验目的 掌握PCR-SSP的原理,了解HLA基因分型的基本方法。 二、实验原理 编码HLA的基因具有高度的多态性,每一个基因座位上有众多的复等位基因,而每一个等位基因都有其各自的DNA序列,因此可用相应的序列特异性引物( sequence specific primers ,SSP)进行扩增。通过控制PCR反应条件,特异性引物仅扩增与其相应的等位基因,而不扩增其他的等位基因。 PCR-SSP检测 HLA -B27 一、实验目的 掌握PCR-SSP的原理,了解HLA基因分型的基本方法。 二、实验原理 编码HLA的基因具有高度的多态性,每一个基因座位上有众多的复等位基因,而每一个等位基因都有其各自的DNA序列,因此可用相应的序列特异性引物( sequence specific primers ,SSP)进行扩增。通过控制PCR反应条件,特异性引物仅扩增与其相应的等位基因,而不扩增其他的等位基因。 HLA-B27检测操作流程 一、DNA的提取 1、取1ml RBC裂解液入血样管中混匀,裂解RBC; 2、离心4000rpm?2min; 3、重复步骤1-2两次,最后用棉签吸干管壁液体; 4、取50ulWBC裂解液入上述WBC管中混匀; 5、将WBC管
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