基因的功能验证-陈璟.pptxVIP

基因的功能验证 陈璟 2012.09.2520世纪人类科技史上的三大创举90年代人类基因组计划60年代人类首次登上月球40年代第一颗原子弹爆炸基因组学概念基因组学包括3个不同的亚领域结构基因组学(structural genomics)功能基因组学(functional genomics)比较基因组学(comparative genomics) 一是通过增强其表达，取得表达产物进行研究， 增强其表达因为不能反映基因产物的真实表达情况，而逐渐被抛弃 基因的异源表达，在近缘物种类表达目的基因。 二是减弱或者终止其表达，观察整体功能的变化，进而推测相应的基因功能酵母双杂交技术Transcription Activating RegionPrey ProteinBait ProteinReporter GeneDNA-Binding DomainDNA-Binding Site反式作用因子中的两个功能结构域 DNA结合域 转录激活结构域酵母双杂交系统应用鉴定新的蛋白与蛋白相互作用鉴定蛋白级联底物 鉴定突变对蛋白与蛋白结合的影响在已知的相互作用中鉴定干扰蛋白质 (反向双杂交系统)利用酵母作为真核蛋白相互作用的模型第一相电泳根据蛋白质的不同等电点分离各种蛋白质，即等电聚焦法(isoelectrie focusing IEF)第二向电泳根据蛋白质的不同分子量进一步分离等电点相同的蛋白质，即