大学生物实验——核酸提取与检测.ppt

大学生物实验——核酸的提取与检测 一、实验目的与要求 二、实验原理 细菌（bacteria）为原核微生物的一类，是一类形状细短，结构简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物。 根据革兰氏染色法，可将细菌两大类：革兰氏阳性菌和阴性菌。两者主要是细胞壁的结构不同。 常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌、霍乱弧菌及脑膜炎双球菌等。 二、实验原理 大肠杆菌（Escherichia?coli）是人和动物肠道中最著名的一种细菌，主要寄生于大肠内，约占肠道菌中的1%。是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。 二、实验原理 细菌染色体（chromosome of bacteria）：由一条双股环状DNA分子组成，附着在横隔中介体或细菌膜上。细菌染色体无组蛋白包绕。 细菌染色体上的基因与真核细菌不同，无内含子，转录后形成的mRNA不必再剪切、拼接，可直接翻译成多肽。 大肠杆菌的DNA双链长达1.1~1.4 mm，是菌体长度的1000倍。 二、实验原理 细菌基因组DNA提取原理: 采用细菌裂解液使细菌裂解，并裂解液中的DNA高效特异性的结合到硅基质离心吸附柱上，而其它污染物可流过膜，PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度DNA。 纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Ti