食品理化检验-兽药.docxVIP

兽药残留的概念、来源及危害。Veterinary drugs：指用于预防、治疗和诊断动物疾病或者有目的地调节动物生理机能并规定作用、用途、用法、用量的物质（含药物饲料添加剂）Residue of Veterinary Drugs：食品动物用药后，动物性食品（肉、乳、蛋、禽、鱼、水产及其制品和蜂蜜等的统称）中含有的某种兽药的原形或其代谢物以及与兽药有关的杂质的残留。抗生素类、合成抗菌素类、激素药类和驱虫药类食品中兽药残留的来源 防治畜禽疾病用药（用药不当或不遵守休药期）,饲料中加入兽药添加剂（低于治疗剂量的兽药作为添加剂长期添加）,动物性食品保鲜（抗生素抑菌）兽药残留的危害 1.毒性作用（Poisoning） 2.耐药性（Drug resistance）3.过敏反应（Anaphylactoid）4.激素样作用（Hormonelike effect）5.污染环境影响生态GC、HPLC、ELISA法和仪器联用等应用于兽药残留检测的优缺点。ELISA优点：选择性强、灵敏度高、分析过程简单、分析速度快，常用作兽药残留检验的筛选方法缺点：影响因素多，易出现假阳性结果GC优点：准确度高（μg/kg级），常规分析方法，满足大多数兽药残留的检测要求缺点：大多数兽药呈极性或沸点偏高，需烦琐的衍生化步骤HPLC优点：准确度高，常规分析方法，满足大多数兽药残留的检测要求缺点：对于某些兽药残留，达不到检测要求TCs、CAPs、SAs、NFs等兽药的基本结构和化学性质、检测方法的原理和注意事项。抗生素类兽药残留检验1.四环素类抗生素 HPLC（国标GB/T5009.116-2003）、TLC和ELISAHPLC法原理：试样经提取、微孔滤膜过滤后直接进样，用反相色谱分离，紫外检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性、标准曲线法定量（或标准加入法定量）。方法说明：（1）在流动相中加入NaH2PO4并调节pH为2.5，可以改善TCs在C18柱上的分离度和峰形；（2）用5％高氯酸处理样品时，当pH值低于蛋白质等电点时，蛋白质以阳离子形式存在，高氯酸可与蛋白质阳离子形成不溶性盐而沉淀，通过离心除去；（3）本方法对TCs兽药残留的加标回收率分别为：OTC：82%~93%；TC：80%~90%；CTC：80%～95%；（4）出峰顺序为：OTC、TC、CTC；（5）检出限：TC：0.15mg/kg、OTC：0.20mg.kg、CTC：0.65mg/kg。2.氯霉素类抗生素 GC、HPLC、LC-MS（国标GB/T18932.19-2003）、ELISAGC法原理：试样经提取、净化和衍生化后，用毛细血管气相色谱柱分离，电子捕获检测器检测，用保留时间定性、标准曲线法定量。方法说明：（1）对CAP、TAP、FF分离效果较好，检测限在1～2 ng/g范围内，回收率为76.4～107%；（2）衍生化可使兽药分子中的极性基团（羟基、氨基、羧基等）变成弱极性的易于挥发的化合物，从而可适合GC的分析要求，本法使用硅烷化衍生剂效果较好；（3）本法常用于牛奶中CAPs残留检验。LC-MS法原理：样品用乙酸乙酯提取，提取液浓缩后再用水溶解，固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱联用仪测定，外标法定量。方法说明：（1）国家标准方法；（2）适用于蜂蜜中CAP残留检验，检测限为2ng/g，回收率为99％；（3）本法常用于CAPs确认检验。3.磺胺类兽药残留检验 GC、HPLC、GC-MS、ELISA、TLC和分光光度法HPLC法原理：动物性食品样品用乙腈提取后，加正己烷萃取除去脂溶性杂质，再加入正丙醇，减压干燥，残留物用乙腈溶解，过氧化铝柱净化除去杂质，再加正丙醇，减压干燥后的残留物用流动相溶解，所得样液用HPLC-紫外检测器检测，与标准比较，用保留时间定性，标准曲线定量。方法说明：（1）磺胺类药物的最大吸收波长在260～280nm，选270nm同时测定多种磺胺类药物；（2）具对氨基苯磺酰胺结构，极性较强，95％乙腈极性较小，洗脱能力相对较弱，仅能洗除杂质，70％乙腈溶剂极性相对较大，洗脱能力强，能将氧化铝B小柱中的磺胺类药物洗脱出来；（3）氧化铝B柱为碱性氧化铝；（4）检出限：0.05μg/g。4.硝基呋喃类兽药残留检验 ELISA、HPLC、LC-MS和LC-MS/MSHPLC法原理：畜禽肉样品与C18填料充分研磨混匀后装入玻璃层析柱中，用正己烷冲洗，真空抽干后，用乙酸乙酯洗脱，洗脱液减压浓缩至干，用流动相溶解，过氧化铝小柱后供HPLC测定，与标准比较，用保留时间定性，标准曲线法定量。方法说明：（1）适用于鸡的肌肉、肝、肾组织和鱼肉组织中呋喃唑酮残留检测；（2）检出限和回收率：鸡肉组织10μg/kg，加标回收率80～110％；鱼肉组织25μg/kg，加标回收率70～120％ ；（3）样品与C18填料在