基因定点突变技术试卷.pptVIP

2、寡核苷酸引物诱变 使用化学合成的含有突变碱基的寡核苷酸片段作为引物，启动单链DNA分子进行复制，随后这段寡核苷酸引物便成为了新合成DNA子链的一个组成部分，因此所产生出来的新链便具有已发生突变的碱基序列 3、重叠延伸介导的定点诱变 4、大引物诱变法 首先用正向突变引物（M）和反向引物（R1），扩增模板DNA产生双链大引物（PCR1），与野生型DNA分子混合后退火并使之复性，第二轮PCR中加入正向引物（F2），与PCR1中产生的一条互补链配对，扩增产生带有突变的双链DNA。由于F2中的退火温度显著高于第一轮PCR所使用的引物M和R1，因此，可忽略引物M和R1在本轮反应中所造成的干扰。 基因定点突变技术 目录 一、定点突变简介 二、基因定点诱变 三、基因定点突变应用 四、展望 一、定点突变简介 定点突变（site-directed mutagenesis）技术可以有目的性地在已知ＤＮＡ 序列中取代、插入或缺失一定的核苷酸片段，可以有目的或针对性的改变ＤＮＡ序列中的碱基次序；它不仅可以用来阐明基因的调控机理，也可以用来研究蛋白质结构与功能之间的关系。 　　 定点突变技术通过寡核苷酸盒式诱变、寡核苷酸引物介导、重叠延伸介导和大引物诱变法介导（PCR介导）等途径来实现。盒式突变是利用一段人工合成的含基因突变序