同位素示踪技术及应用_培训课件.ppt

* 一、放射性半衰期 一般要选择最适宜的半衰期τ的放射性同位素，使τ足够长，从而使衰变校正有意义或干脆不必作衰变校正，同时又要足够短，能较安全地进行示踪实验，并使得放射性废物容易处理。 * 在实际工作中，使用的放射性同位素的半衰期应该与实验需要持续的时间t相适应，如对于某个实验： 当t／τ＝0.04时，应选放射性同位素的衰变校正为3.5％； 当t／τ＝0.10时，应选放射性同位素的衰变校正为6.6％； 当t／τ＝0.15时，应选用其衰变校正为10％。 * 体外示踪一般选用半衰期较长而射线强度适中，既利于探测，又易于防护和保存的放射性示踪剂。 体内示踪时，若实验周期短，应选用半衰期短，且能放出一定强度γ射线放射性同位素，若实验周期长，如需要将动物活杀后对组织脏器分别测定的，则应选用半衰期较长放射性同位素。 * 此外，根据实验目的来选用定位的或不定位的标记示踪剂。例如研究氨基酸的脱羧反应，14Ｃ应标记在羧基上，只有这种定位标记的氨基酸，才能在脱羧后产生14CO2。而有些实验不要求特定位置标记，只须均匀标记即可。 * 二、辐射类型和能量 ?探测效率高，易于防护；32P; 14C, 3H ?穿透性好，100-600 keV; 99Tc, 111In, 201Tl 三、放射性比活度 原始比活度足够高； * 四、放射性核素的纯度 检验放射性纯度和放射化学纯度；提纯。 在示踪剂制备期间、贮存期间，试验体系中所使用的溶剂、化学试剂、酶等可能会产生化学杂质、放射化学杂质及辐射自分解引起的放射性杂质，这些杂质的存在，使得示踪实验中使用的示踪剂不“纯”，而或多或少影响实验的结果，甚至会导致错误结论。 * 五、放射性核素的毒性 尽量选择低毒组核素； 90Sr 高毒 , 89Sr 中毒。 六、示踪剂的生物半衰期 选择生物半衰期短的示踪剂，减少辐射剂量。 * 5.2 放射性同位素测量方法的选择 一、探测器的选择 取决于射线种类，对于α射线通常可用硫化锌晶体、电离室、核乳胶；对能量高的β射线可用云母窗计数管、塑料闪烁晶体及核乳胶测定，对于能量低的β射线可用液体闪烁计数器测量；对于γ射线则用G-M计数管，碘化钠（铊）闪烁晶体探测。目前大多数实验室主要采用晶体闪烁计数法和液体闪烁计数法两种测量方式。 * 二、最佳测量条件的选择 同一台探测仪器对不同量的示踪剂具有不同的最佳工作条件，在实验准备阶段要检查探测器是否已调到所用示踪同位素的工作条件，否则需要用一定量的示踪剂作为放射源(或选用该同位素的标准源)，把探测器的最佳工作条件调整好，并且要保证探测器性能处于稳定可靠的状态。 * 二、最佳测量条件的选择 坪曲线 最好的品质因素 测量时间和测量次数 剂量及给入途径的选择 通常小于1～几μCi，用量控制在最大允许剂量之内，避免辐射效应。样品中所含放射性强度的要求，是使其放射性计数率大于或等于本底计数的10～20倍。 * 6 同位素示踪的应用 化 学：反应过程； 生命科学：代谢、物质转化、生命现象； 医 学：免疫化学、疾病的诊断； 农、牧学：代谢、灭害； 地质科学：地下水流向和流速、油田开发； 工程问题：地下管网渗漏、机械磨损； 药物 . . . . . . . * 6.1 在化学研究中的应用 分子结构的研究： 同位素交换反应。 化学反应机理研究： 化学键的形成方式。 反应中发生的分子重排、异构、裂解、水解过程。 催化反应中吸附催化机理、吸附分子寿命。 * 17世纪：光学显微镜发明标志着生物医学发 展中的里程碑 20世纪：放射性示踪技术的诞生对生物学推进同样重要 6.2 在生物学中的应用 * 研究植物的营养生理、对营养元素以及农药的吸附、转运、分配和积累规律。 研究人和动物体内物质的吸收、分布、代谢和排泄情况。 为分子生物学提供原子和分子水平的研究手段 应用于基因工程 。 * 6.3 在生物化学研究的应用 生物体内的物质代谢。 确定代谢途径或中间代谢环节。 找出代谢物在体内发生变化之后的产物。 找出体内存在的各种生化物质的前身。 * 传统实验方法 整体实验。 离体实验。 传统实验方法的缺点。 同位素示踪法 示踪量，不破坏体内生理过程的平衡。 3H（T1/2=12.3 y), 14C(T1/2=5730 y)。 液体闪烁测量; 加速器质谱法（AMS）。 * 研究光合作用 单细胞绿藻悬液+光+14CO2 纯化悬液，提取内含物 双向纸层析分离 放射自显影 14C-3-磷酸甘油酸 14C-1，3-二磷酸甘油酸 14C-葡萄糖 1940， Calvin确定了碳固定循环，并发现了相应的酶。