同型半胱氨酸与脑血管疾病_培训课件.ppt

Yoo等发观MRA显示2～3个部位脑血管狭窄患者的Hcy浓度明显高于一处狭窄或没有狭窄的脑梗死患者。 Hcy水平中度升高与狭窄血管数量显著相关。 同型半胱氨酸含量升高，或者叶酸、维生素 B12的缺乏，都会增大患痴呆症的危险性。同 型半胱氨酸水平超出14umol/L，患老年性痴呆的危险性加倍。 英国OPTIMA项目研究发现：同型半胱氨酸水平大于11.2 umol/L的病人，3年后随访，发现他们大脑颞叶快速萎缩。同型半胱氨酸水平升高，影响了神经递质、磷脂等的甲基化。同型半胱氨酸还通过神经毒性氧化作用引起DNA损伤促进细胞凋亡导致痴呆。 Yoo等报道78例脑梗死患者和140例对照者的研究显示，患者组血浆Hcy浓度平均值比对照组高3.3倍，且患者组存在2处或3处血管狭窄的血浆Hcy水平明显高于仅有1处或血管正常者。 卒中患者tHcy水平的变化可能出现下列情况 发病后立即下降，紧接着在康复期恢复至原来的水平； 发病后无变化，或立即升高，紧接着在康复期进一步升高； 血清白蛋白含量下降，导致测定tHcy水平的人为误差； 由于卒中后氧化基团产生增多，引起包括Hcy在内的巯基化合物的清除增加。 Hcy导致脑血管病的可能机制 Hcy通过其硫基发生自氧化，促进氧自由基和过氧化氢的生成，引起血管内皮损伤和功能障碍，造成血管内皮细胞骨架结构发生变化，加速低密度脂蛋白氧化，增加泡沫细胞形成，使血管内壁增厚，甚至形成闭塞。 Hcy可以抑制谷胱甘肽过氧化酶的活性，此酶是增强NO作用的关键酶，说明Hcy通过促进过氧化物的形成，抑制其代谢灭活而导致血管内皮细胞受损。另外，Hcy还可以抑制其他抗氧化酶，去束因子和PAG基因表达。 同型半胱氨酸是动脉粥样硬化形成的一种独立危险因素，它可以通过诱导细胞粘附分子和趋化因子的表达促进动脉粥样硬化形成的早期事件-单核细胞粘附于血管内皮细胞，并迁入内皮摄取脂质转化为泡沫细胞的发生。高同型半胱氨酸血症患者的血清中亦可检出增高的可溶性细胞粘附分子和趋化因子。 Hcy还能增加单核细胞IL-6的释放，IL-6作为一种多功能的促炎因子，既能诱导急性期蛋白的产生和IL-8的释放，TNF-a的作用与IL-6相似，可促进自身及其他因子的表达，又是淋巴细胞的激活剂，可增强细胞生成因子的促分裂效应，促进平滑肌细胞增生。 Hcy可以导致细胞凋亡，Hcy浓度高时凋亡细胞数较高，并伴有caspase-3表达和活化增强，还可以使动脉平滑肌细胞内cyclin mRNA 和fos癌基因表达增加，诱导静止细胞进入分裂期，促进平滑肌细胞迅速增殖，导致动脉粥样硬化的产生。 Hcy可以诱导炎症、免疫反应共同的转录因子NF-KB的激活，而NF-KB是一种有双向调节作用的转录因子，能调控包括IL-6在内的多种细胞因子增多，加重炎症反应造成细胞损伤和细胞凋亡。 Hcy还可以通过改变内皮细胞抗血栓特征，改变血液成分如血小板、凝血因子、抗凝血成分而导致血栓前状态。Hcy及其衍生物能增加血小板产生血栓素，从而影响血小板聚集和凝血因子V的活性，促进凝血和抑制抗凝，导致患者动脉粥样硬化。 甲硫氨酸负荷后的血浆Hcy中度增高常伴有低纤溶活性，说明其在形成血栓机制中可能还与干扰了纤溶系统有关。这些因素分别或以不同形式组合共同促进了动脉粥样硬化和血栓的发生，从而导致脑血管疾病的发生。 血浆Hcy的检测 正常情况下，血浆Hcy含量甚微； 但如果细胞的Hcy代谢发生障碍，Hcy不能循上述途径正常代谢，血浆Hcy浓度就会升高。 正常血浆中70％Hcy以二硫键形式与蛋白结合，储存血浆会引起血浆巯基重新分布，使结合部分增多，游离部分减少，所以，临床实验室通常测血浆中总的Hcy浓度。 高Hcy血症是指空腹总Hcy水平和(或)蛋氨酸负荷后的血浆总Hcy浓度超过正常对照组的95％。 高效液相色谱法(HPLC)是经典的检测方法，但操作比较复杂，试验耗时较长，在临床应用方面逐渐被酶免疫分析法和荧光偏振分析法所取代。 体内的Hcy以还原形式或氧化形式存在，目前所采用高效液相色谱法均使用还原剂可以使所有形式的Hcy转变成还原形式，因此，HPLC方法所测定的Hcy为总Hcy。 Hcy检测方法 酶免疫分析法(EIA)是临床上测定同型半胱氨酸水平的常用方法，其特点是操作比较方便、快捷，重复性好，方法稳定可靠。缺点是大部分操作还是手工操作，比较耗时。 使用酶将血样中所有形式的Hcy转变成S-腺苷-L-Hcy，然后加入酶标的抗S-腺苷-L-Hcy的单克隆或多克隆抗体，采用竞争结合的原理，将不同水平的标准品与酶标抗体竞争结合，然后以显 色试剂和终止试剂分别进行显色和终止，制作出hcy浓度与发色强度的标准曲线。样品也按相同步骤处理，在标准曲线上就可以查出其Hcy的浓度。 离子色谱法 主要用于实