ABO血型鑒定操作规程.docVIP

1.0  原理  ABO 血型鉴定操作规程  2.0 3.0 4.0 5.0 5.1 5.2 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 7.0 7.1  根据红细胞上和血清（或血浆）中有无 A 抗原和（或）B 抗原及其抗体，将血型分为 A 型、B 型、AB 型及 O 型。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定 ABO 血 型。正定型正定 是指用已知抗-A、抗-B 血清来检测受检红细胞上有无相应的 A 抗原和（或） B 抗原；反定型反定 是指用已知 A1型、B 型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相 应的抗-A 和（或）抗-B。 原始样品要求 5 mL 静脉全血。 样品容器和添加剂 真空试管，EDTA.K2抗凝/普通试管，不抗凝。 检测环境要求 温度：18～27，湿度：30%～70%。 所需材料和设备 设备 普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。 材料 抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水 （NS）、干净空试管。 检测操作过程 将受检标本以 1000g 离心 5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用 NS 洗涤三次后，配成 3%～5%红细胞悬液。 取 6 支小试管，分别标记“-A”、“-B”、 “自身”、 “Ac”、“Bc”、 “Oc”。 在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各 50 L ，其余管加入受检血浆/血清各 100 L 。 在“-A”、“-B”、 “自身”管中加入受检者 3%～5%红细胞悬液各 50 L ，摇匀。 在“Ac”、“Bc”、 “Oc”管中分别加入 A1、B、O 红细胞试剂各 50 L ，摇匀。 1000g 离心 15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。 根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在 4、37下观察结果。 结果判断 凝集强度判断标准见表 1。 表 1 凝集强度判断标准表  凝集强度 4+ 3+ 2+ 1+ ± -或θ MF pH H  判断标准 红细胞凝集成一大块，液体背景透明，无游离红细胞 数个大凝集块，液体背景透明，无游离红细胞 有很多小凝集块，液体背景透明，无游离红细胞 有许多很小的凝集块，肉眼可见，液体背景不透明，有游离红细胞 微小的凝集块，肉眼很难看清，需要用显微镜观察 无凝集，无溶血，全是游离红细胞 混合凝集外观，镜下可见少数红细胞凝集，而大部分是游离红细胞 部分溶血 完全溶血  7.2  ABO 血型结果判断见表 2： 正定型 抗-A 血清血 抗-B 血清血  Ac  表 2 2 血型结果判断表 反定型定 Bc Oc  自身对照  血型  ＋ ― ― ＋  ― ＋ ― ＋  ― ＋ ＋ ―  ＋ ― ＋ ―  ― ― ― ―  ― ― ― ―  A B O AB  7.3 7.4 8.0 9.0 10.0  注：“＋”表示凝集或溶血；“―”表示不凝集。 正反定型不一致、ABO 抗原减弱、抗-A 或抗-B 减弱、O 细胞凝集时，排除人为操作 错误后，执行《疑难血型鉴定操作规程》进行最终确认。 根据上述判断标准，作出结论并记录在《免疫血液学检查实验记录》。 结果报告 根据实验结果，打印《免疫血液学实验报告》。报告的形式为：A 型/B 型/O 型/AB 型。 实验结果解释 实验结果为 A 型、B 型、AB 型，O 型，说明受检者 ABO 血型分别属于 A 型、B 型、 AB 型，O 型。红细胞上分别有 A 抗原、B 抗原、皆有 A 抗原和 B 抗原、皆无 A 抗 原和 B 抗原；血浆中分别有抗-B、抗-A、抗-AB、皆无抗-A(B)。 质量控制 当受检标本与正、反定型试剂反应，凝集强度少于 2+时，取标准抗-A、抗-B 或 A、 B、O 红细胞与正、反定型试剂反应，以验证试剂效能是否下降。  11.0 11.1 11.2 11.3 11.4 11.5 11.6 11.7 11.8