第八章微生物遗传变异选育保藏.pptVIP

第五节 菌种选育 证实接合过程需要细胞间的直接接触的 “U”型管实验（ Bernard Davis，1950 ） 2. 机制 (大肠杆菌的接合机制) 接合作用是由一种被称为F因子的质粒介导 F因子的分子量通常为5×107，上面有编码细菌产生性菌毛 （sex pili）及控制接合过程进行的20多个基因。 含有F因子的细胞：“雄性”菌株（F+），其细胞表面有性菌毛 不含F因子的细胞：“雌性”菌株（F-），细胞表面没有性菌毛 F因子为附加体质粒 既可以脱离染色体在细胞内独立存在，也可插入（整合）到染色体上 F因子的四种细胞形式 a）F-菌株， 不含F因子，没有性菌毛，但可以通过 接合作用接收 F因子而变成雄性菌株（F+）； b）F+菌株， F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。 c）Hfr菌株，F因子插入到染色体DNA上，细胞表面有性菌毛。 d）F′菌株，Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时， 形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为F′因 子。 细胞表面同样有性菌毛。 1） F+×F-杂交 杂交的结果：给体细胞和受体细胞均成为F+细胞 理化因子的处理可将F因子消除而使F+菌株变成F-菌株 F+菌株的F因子向F-细胞转移，但含F因子的宿主细胞 的染色体DNA一般不被转移。 Hfr菌株的F因子插入到染色体DNA上，因此只要发生接合转移转移 过程，就可以把部分甚至全部细菌染色体传递给F-细胞并发生重组 ，由此而得名为高频重组菌株。 2）Hfr ×F-杂交 3）F′×F-杂交 Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时， 形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子， 特称为F′因子。 F′×F-与F+×F-的不同：给体的 部分染色体基因随F′一起转入受体细胞 a）与染色体发生重组； b）继续存在于F′因子上， 形成一种部分二倍体； 三、细菌的转导（transduction） 由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种方式： 一个细胞的DNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中 能将一个细菌宿主的部分染色体或质粒DNA 带到另一个细菌的噬菌体称为转导噬菌体 细菌转导的二种类型： 普遍性转导 局限性转导 1、普遍性转导（generalized transduction） 噬菌体可以转导给体染色体的任何部分到受体细胞中的转导过程 (1) 意外的发现 1951年，Joshua Lederberg和Norton Zinder为了证实大肠杆菌以外 的其它菌种是否也存在接合作用，用二株具不同的多重营养缺陷型 的鼠伤寒沙门氏菌进行类似的实验： 用“U”型管进行同样的实验时，在给体和受体细胞 不接触的情况下，同样出现原养型细菌！ 第三节 基因突变及修复 指遗传物质（DNA或RNA）中的核苷酸序列 发生了稳定的可遗传的变化，从而导致了生物 性状的改变。 基因突变： 第三节 基因突变及修复 一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变 基因突变： 基因突变是重要的生物学现象，它是一切生物变化的根源，连同 基因转移、重组一起提供了推动生物进化的遗传多变性。 基因突变 突变 自发突变 诱变 环境因素的影响，DNA复制过程的偶然错误等 而导致，一般频率较低，通常为10-6-10-9 。 某些物理、化学因素对生物体的DNA进行直接 作用，突变以较高的频率产生。 突变可以通过DNA复制而成为真正的突变，也可以重新变为原来的结构， 这取决于修复作用和其它多种因素。 DNA损伤修复机制 一、基因突变的类型 表型 基因型 这里主要介绍几种常用的由于基因突变而造成微生物表型变化 的突变型及其分离 基因型－－碱基变化与遗传信息的改变 1.同义突变 2.错义突变 3.无义突变 4.移码突变 1 营养缺陷型（auxotroph） 一种缺乏合成其生存所必须的营养物（包括氨基酸、维生素 、碱基等）的突变型，只有从周围环境或培养基中获得这些 营养或其前体物（precursor）才能生长。 表型判断的标准： 在基本培养基上能否生长 营养缺陷型是微生物遗传学研究中重要的选择标记和 育种的重要手段 表型－－可观察或可检测的个体性状或特征 1、 营养缺陷型（auxotroph） 特点： 在选择培养基（一般为基本培养基）上不生长 负选择标记 突变株不能通过选择平板直接获得 营养缺陷型的表示方法： 基因型： 所需营养物的前三个英文小写斜体字母表示：hisC （组氨酸缺陷型，其中的大写字母C同一表型中不同基因的突变） 表型： 同上，但第一个字母大写，且不用斜体：HisC 在具体使用时多用hisC-和hisC+，分别表示缺陷型和野生型。 2、抗药性突变型（resistant mutant） 基因突变使菌株对某种