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- 2016-12-01 发布于重庆
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實验指导手册[学生版]
制药工艺学实验
学习指导书
(第六版)
西南科技大学
生命科学与工程学院
二○一二年二月
实验一 离子交换层析分离混合氨基酸
一.目的要求
学习采用离子交换树脂分离混合氨基酸的基本原理并掌握离子交换层析法的基本操作技术。
二.实验原理
离子交换层析法主要是根据物质解离性质的差异进行分离的方法。本实验用苯乙烯性季铵型阴离子交换树脂分离酸性氨基酸(天冬氨酸pI=2.77)以及碱性氨基酸(赖氨酸 pI=9.74)的混合液。在特定的 pH 条件下,它们与树脂的结合能力和解离程度不同,通过改变洗脱液的pH值或盐离子浓度可进行分离。
三.实验器材和试剂
1.苯乙烯性季铵型阴离子交换树脂(201×7,717型,100-200目天冬氨酸、赖氨酸
洗脱液(pH 4.2的柠檬酸缓冲液):0.lmol/L柠檬酸54m1加0.1mol/L柠檬酸钠46ml
5.氨基酸显色液(茚三酮溶液):2g茚三酮溶于100mL无水乙醇中。
6.砂芯层析柱(Ф1×20cm)、试管(Ф1×12cm)及试管架(40孔)、铁架台(带夹)、胶头长滴管、牛角药匙、橡皮筋(捆试管)、250ml抽滤瓶(带砂芯漏斗)、称量纸、pH试纸(1-14)(0.5-5)
7.电子天平(千分之一)、恒温水浴锅、真空泵
四.实验方法
1.树脂的处理:100ml烧杯中置约10g树脂,加25ml
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