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3.1 菌种生产流程及设备 1. 菌种及菌种类型 菌种是一种重要的生物资源,根据使用目的不同,主要可以分为保藏用菌种、试验用菌种和生产用菌种。从食用菌栽培的角度而言,所谓的菌种就是指生产用菌种。 3.1 菌种生产流程及设备 3.1 菌种生产流程及设备 菌种经过三级逐步扩大培养,菌丝体数量大大增加,菌丝越来越粗壮,分解养料的能力,适应环境的能力也越来越强。在生产上只有用这样的菌丝体播种,才能获得高产优质的子实体。 3.1 菌种生产流程及设备 2. 菌种生产流程 3.1 菌种生产流程及设备 菌种制作包括四个基本环节: 配制培养基→灭菌→接种→培养 无论制作哪一级菌种,也无论制多少菌种,即:只要是制作菌种,就必须经历这四个基本环节。而且制种是一个连续的过程(即一个工艺流程),若制种过程中某一个环节做得不好,就会导致整个制种工作的失败。 3.1 菌种生产流程及设备 3. 制种设备 (1)配制培养基设备:切片机、粉碎机、过筛机、拌料机、装瓶或装袋机; 搅拌机:将培养料通过搅拌使其分布充分均匀的专业机械 装瓶机:将培养料装入菌种瓶的专用机械 3. 制种设备 3. 制种设备 (3)接种设备:接种箱或超净工作台 接种工具 3. 制种设备 培养室 3. 制种设备 3.2 培养基的制备技术 1. 母种培养基的制备 2. 原种和栽培种培养基的制备 基本采用农林副产品加适量无机盐和水调制而成; 配方种类繁多,可根据培养食用菌的种类及原料是否容易获得加以选择; 含水量60-65%左右。 装料松紧适度,过紧会导致通气不良,菌丝生长慢;过松会导致菌丝生长脱节。 用木棒在培养基中央扎孔,包扎瓶口。灭菌。 原种和栽培种培养基配方 ①木屑培养基: 阔叶木屑 80%;麸皮 18%;CaCO3 1%;蔗糖 1% 适于培养平菇、香菇、滑菇、猴头、木耳等 ②玉米芯培养基 玉米芯 75%;麸皮 20%;石膏粉 2%;过磷酸钙2%;糖1% 适于培养平菇、榆黄菇、凤尾菇等 ③棉籽壳培养基 棉籽壳 78%;麸皮 20%;石膏粉 1%;糖1% 适于培养平菇、木耳、银耳、猴头、金针菇等 ④谷粒(玉米粒、麦粒)培养基 谷粒 98%;CaCO3 2%;适于培养双孢蘑菇、平菇等 ⑤稻草培养基 稻草(切碎1~2cm)79%;米糠 20%; CaCO3 1% 适于培养草菇、平菇等 3.3 菌种的分离与培养 1. 组织分离法 将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法。 2. 孢子分离法 利用子实体产生的成熟有性孢子分离培养获得纯菌种的方法。 属于有性繁殖,后代易发生变异,可用此法培育新品种。 操作过程: 孢子的采集→孢子的分离→孢子的萌发 孢子分离法可分为多孢分离与单孢分离两种方法 2. 孢子分离法 将许多孢子移接在同一培养基上,在适宜条件下萌发成菌丝,通过自由交配获得纯菌种的方法。对于不易组织分离,孢子易萌发的胶质菌类,采用多孢分离培养较易成功。 (1)多孢分离 空中孢子捕捉法 当伞菌孢子弹射时,形成“孢子云”,此时打开培养皿盖或试管棉塞,对准“孢子云”掠几下,随即盖上皿盖或塞上棉塞,适温培养。 褶上涂抹法 选用刚开伞的种菇,将灭菌过的接种针用无菌水沾湿,准确地插入菌褶片之间,轻轻涂抹菌褶表面,使孢子沾附在接种针上,再在培养基上划线接种。 (2)单孢分离 在试管斜面培养基上只接种一个孢子,使它萌发成菌体而获得纯菌的方法。 单孢分离法适于同宗结合的双孢蘑菇、草菇等,对于异宗结合的食用菌如平菇、香菇等只能作为杂交育种的材料。 单孢分离时常将孢子悬液进行梯度稀释,最后可得到只含有一个孢子的稀释液。 3. 基内菌丝分离法 从生长子实体的培养基中分离菌丝获得纯培养的方法。 特点:易感染杂菌。 基内菌丝分离法一般只在下列情况下采用: ① 子实体已腐烂 ② 有些子实体小而薄,用组织分离法和孢子分离法较困难。 ③ 还有一些菌类如银耳菌丝,只有与香灰菌丝生长在一起才能产生子实体,如果要同时得到这两种菌丝的混合种,也只能采用基内菌丝分离法进行分离。 3.3 菌种的分离与培养 4. 菌种的扩大繁殖 (1)母种的转管扩繁 目的在于增加母种数量。母种转管扩繁时,最好一次多接一些管,转管传代最多不超过5次,每支斜面菌种可 转接15~20支母种 (1)母种的转管扩繁 左手拿两支试管,一支为经灭菌的斜面,另一支为已长好的菌种。右手拿接种钩(已在火焰上灼烧灭菌又冷却),并同时用右手轻轻拔下两支试管的棉塞或试管帽。 将试管口通过火焰数次,并稍转动,以防环境中的微生物落入。 将接种钩伸入有菌试管,连同培养基钩取黄豆粒大小的菌丝块,并迅速将菌丝块
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