动态突变——PBL程序.ppt

Dynamic mutation Dynamic mutation 动态突变 introduction 动态突变是指DNA中的重复序列拷贝数发生不稳定的持续扩增为特征的一类突变。 动态突变中的重复序列从3bp～ 33bp不等。这种突变是不稳定的,可能随着世代的传递而累积,当重复序列的拷贝数超过某个正常范围时,便会引起疾病或出现脆性位点。 动态突变所引起的疾病可有早现和性别差异的特点 动态突变 CATALOGUE 1 2 3 动态突变的机制 动态突变的致病机制 动态突变的主要相关疾病 动态突变的机制 * 动态突变的机制 重复片段的扩增与DN A复制过程中的错误有关 “链滑”机制 DNA复制时,以含有重复序列的DNA单链为模板合成的新链可以由于链滑作用造成碱基错配, 如果错配引起新生链上形成泡状或发卡等单链结构,则造成重复片段的扩增，反之如促使母链形成泡状或发卡结构,也可以导致新生链的缺失。 多余环状或发卡结构或者随后被核酸酶切除而修复,或者在错配修复缺陷等情况下未被切割修复而保留在新生链中,从而产生重复序列拷贝数的扩增。 冈崎片段的合成过程与链滑的产生可能有关。 * 动态突变的机制 动态突变的机制 Heidenfelder等通过对Friedreich共济失调( Friedreich s ataxia ) 的研究第一次证实了DN A复制过程中有( GAA) n和( TTC) n发卡结构的形成。 已发现的几种重复序列, 如脆性X 综合征的CCG以及强直性肌营养不良中的CAG重复序列CCG和CAG,其长度显示了不稳定性的双峰分布,小的拷贝数和大的拷贝数之间的差距近似于冈崎片段的长度,暗示着动态突变以冈崎片段为单位进行。 “滑链”证据： 动态突变的机制 另一些研究结果却提示重复片段的扩增与细胞增殖没有因果关系。 比如在HD转基因小鼠模型中,纹状体中CAG重复发生戏剧性的扩增,而这一区域的神经元几乎没有分裂活动 对DM1(强直性肌营养不良)转基因小鼠不同组织的体外培养实验也表明,在不同的组织中重复片段扩增的次数和细胞分裂次数并不相关 反对的声音： 动态突变的致病机制 1 基因功能的丢失 通过阻断或阻碍基因转录导致基因功能的丢失。 例如,肌阵挛性癫痫( EPM1)是由于cystatin B(半胱氨酸蛋白酶抑制剂B)基因转录起始点上游一段12bp重复片段发生扩增,阻断转录因子,是转录功能的丧失而引起的 2 疾病相关基因功能的获得 在动态突变的致病过程中较为常见, 扩增的CAG重复片段被翻译成多聚谷氨酰胺( po lyQ ) ,从而增加了蛋白质分子中polyQ的长度。已证明其对细胞核具有毒性,因此polyQ长度的增加是导致疾 病发生的一个重要因素。 动态突变的致病机制 3 异常RN A的产生 I型DM患者的一种激酶基因的CTG扩增位于3′非翻译区,这种情况同样见于Ⅱ 型DM不被翻译的CC TG扩增。这些扩增的重复片段被转录为RN A后,突变的RN A会滞留在核内,干扰肌核的正常功能,对肌纤维产生毒性 * 动态突变的主要相关疾病 疾病分类 异常扩增引起转录过程受阻 脆性X综合征（Fragile X syndrome, FXS）、Friedreich 共济失调（Friedreich ataxia, FRDA） 1 异常扩增导致病理性RNA 毒性蓄积 强直性肌营养不良症症1 型（Myotonicdystrophy 1, DM1）、脊髓小脑性共济失调10 型（Spinocerebellar ataxia 10, SCA10） 2 编码区核苷酸重复序列异常扩增 脊髓小脑性共济失调3 型（Spinocerebellar ataxia 3, SCA3）、亨廷顿舞蹈病（Huntingtons disease, HD）和肯尼迪病（Kennedy disease, KD）等，因其为CAG 三核甘酸重复序列异常扩增，所以又称为多聚谷氨酰胺疾病(Polyglutamine disease)，简称polyQ 疾病 3 Huntington 舞蹈病 (HD) 999 Hunting to n舞蹈病与位于染色体4p16. 3 的IT15基因有关。 IT15基因在第一个外显子的起始密码子ATG下游处有一段多态性的三核苷酸CAG的重复序列,转录并翻译产生一段多聚谷氨酰胺( po lyQ)连于Hunting ton蛋白的N端。 正常人的CAG重复数9～ 34次, HD患者大于36次。 Huntington 舞蹈病 (HD) PolyQ可造成Huntington的聚集和沉降; Green则提出谷氨酰胺转移酶能够使Hunting ton的po lyQ与其他氨基酸的赖氨酸残基发生交连会对细胞产生毒性作用; 一些学者认为polyQ 的扩展会改变Huntin