免疫组织化学技术2幻灯片.pptVIP

免疫化学技术在科研及临床中的运用 免疫化学技术 一、免疫细胞化学 一、免疫细胞化学 1、定义：利用已知抗体检测细胞爬片上细胞是否存在相应的抗原。 2、原理：抗体+细胞抗原----显色 3、运用：检测相关基因的表达 二、免疫组织化学Immunohistochemistry, IHC 原 理 用 途 试剂配置 操作步骤 免疫组织化学技术定义和原理 用 途 临床病理诊断：肿瘤分类诊断 上皮来源：CK，EMA 间叶来源：Vimentin 淋巴组织: LCA 科研：组织抗原表达情况 试剂准备 结果分析和判断 （1）判断原则 （2）对照设计 （3）非特异染色 （4）失败的原因及其处置方法 （1）判断原则 必须设立染色对照：阴性对照，阳性对照 抗原表达必须在特定部位：胞膜、核、浆 尽量避开出血、坏死及切片刀痕和界面边缘细胞的阳性表达 对免疫组化标记结果的意义不能绝对化 CK—胞浆阳性 （2）对照设计 阳性对照：已知阳性表达的组织 自身对照：同一标本中不同组织对照 阴性对照： A、阴性组织对照：已知阴性表达的组织 B、阴性试剂对照：空白对照 （3）非特异性染色 （3）非特异性染色 （4）染色失败的原因及处理方法 试验片：- 阳性对照片：- 阴性对照片：- 空白对照片：- 切片染色深或整张切片出现染色 抗体浓度过高