生物技術综合实验报告(原生质体相关).docVIP

生物技术综合实验报告 （第一部分） 实验一 工作液的配制、培养基配制、器皿洗涤及灭菌 实验目的 掌握各种工作液配制方法；了解植物培养基的构成及配制方法；掌握高温高压灭菌的方法。 原理 培养基是植物组织培养的基本条件，同时也是关键因素。 湿热条件(121℃的蒸汽，10分钟)能够有效地杀灭附着在玻璃器皿、器具以及溶液和培养基中的微生物达到灭菌的目的。 器具和试剂 灭菌锅，天平，电炉，微波炉，三角瓶，封口膜，移液管，移液器，量筒，烧杯，pH试纸，培养皿，滤纸，Parafilm封口膜。 琼脂，MS培养基大量元素，无菌水，葡萄糖，2, 4-D，IBA，KT （激动素），1M NaOH及HCl，卡那霉素，头孢霉素，乙酰丁香酮 。 四、 实验内容 PH调节剂的配制、培养基母液的配制、培养基的配制、各种相关物品的准备 （一）培养基的配制步骤 1、取个干净烧杯，加入1/3-2/3左右的蒸馏水，用移液管取所需的母液加入烧杯。 2、称取定量的蔗糖加入烧杯中并不断搅拌，直到完全溶解，定容。 3、用NaOH或者 稀HCL调剂酸碱值。 4、称取定量琼脂糖加入烧杯中，加热煮沸搅拌，待琼脂完全溶解，分装。 5、高压灭菌（121℃,15min-20min)。 6、冷却，取出，备用。 （二）棉花无菌苗培养基的制备 1、取25 ml MS大量元素母液，称取葡萄糖15g、